世界首个培育肉类B2B市场：阅读公告
Immortalised cells are solving a key challenge in cultivated meat production: the limited proliferation of primary cells. Unlike primary cells, which stop dividing after a set number of cycles, immortalised...
质地分析对于使培养肉类感觉像传统肉类至关重要。技术如质地剖面分析 (TPA), Warner-Bratzler 剪切测试, 和拉伸测试有助于测量硬度、咀嚼性和刚度等特性。这些方法确保产品在口感和咬合方面符合消费者期望，同时在生产过程中保持一致性。 关键点包括： 质地剖面分析 (TPA)： 通过两次压缩样品模拟咀嚼。测量硬度、弹性和咀嚼性。 Warner-Bratzler 测试： 通过切割纤维来关注嫩度，适用于结构化产品。 拉伸测试： 评估伸展性和刚度，对于复制肌肉纤维排列很重要。 挑战包括样品准备不一致和难以模拟复杂的肉类支架生物材料. 新的发展如多点压痕和将实时流变测试整合到生产中，旨在提高准确性和效率。 对于研究人员来说，像Cellbase这样的平台简化了设备采购，并将生物加工决策与质地结果联系起来。掌握这些方法是确保培养肉类与传统肉类的感官体验相匹配的关键。 与Texture Technologies、BlueNalu, 和Optimized Foods的纹理分析研讨会 - CMS22 sbb-itb-ffee270主要纹理分析方法 用于培养肉类比较的三种主要纹理分析方法 压缩测试 压缩测试或纹理剖面分析 (TPA), 涉及对样品进行两个连续的单轴压缩循环，中间有一个短暂的休息期。此方法模拟人类咀嚼的机械过程，提供产品在消费过程中的行为见解。在测试过程中，探针以3 mm/s的速度将样品压缩至其原始高度的50%，模拟人类咬合的力量。从此测试中得出几个关键参数：...
对于培养肉生产，正确存储原代或永生化细胞系是不可妥协的。不当的存储可能导致细胞活力降低、污染和昂贵的挫折。以下是您需要了解的内容： 短期存储（-80°C）: 适用于经常访问的工作细胞库。使用机械冷冻机，但需注意温度波动的风险和有限的活力（最多6-12个月）。 长期存储（<-130°C） : 液氮蒸汽相罐是主细胞库的黄金标准，停止代谢活动并无限期保存细胞。 冷冻方法: 控制速率冷冻（-1°C/分钟）可防止冰晶损伤。使用DMSO或甘油等冷冻保护剂，并预冷冷冻介质（2-8°C）。 设备选择: 机械冷冻机耗能大且易受电力故障影响。LN2储罐在关键的长期储存中更可靠。 法规遵从性: 遵循GMP标准，保持详细记录，并确保监控系统到位，以进行温度和库存跟踪。 适当的规划和设备选择可确保细胞的活力、可扩展性和符合安全标准。让我们深入了解每个步骤。 如何冷冻细胞：细胞培养基础培训 sbb-itb-ffee270步骤1：确定所需的储存温度 您选择的细胞储存温度取决于您需要保存材料的时间长短。对于短期使用，-80°C就足够了，但对于长期保存，必须低于-130°C的温度以防止随时间的降解。短期储存于-80°C 设定为-80°C的机械冷冻机适合短期使用，特别是在需要经常访问细胞系时。这种设置非常适合于活跃的研究或生产任务。然而，它并不适合长期储存，因为在此温度下长时间使用可能导致冰重结晶，从而损害细胞完整性。如果您计划建立主细胞库，-80°C储存不是一个可行的选择。 长期储存于-130°C以下 对于长期保存，液氮蒸汽相储存系统是行业标准。这些系统维持在-130°C到-196°C之间的温度，有效地停止代谢活动并防止有害冰晶的形成。与直接浸入液氮相比，蒸汽相储存还降低了污染的风险。这种方法对于需要扩大生产流程并维护可追溯、符合GMP标准的主细胞库的培养肉生产商尤为重要。在提供可靠且抗污染的存储的同时，这些系统需要更复杂的管理和持续供应液氮。 [1] 步骤2：选择合适的冷冻方法 选择正确的冷冻方法至关重要，因为如果不仔细管理，过程可能会导致细胞损伤。快速冷却会形成可能刺破膜的大冰晶，而过于缓慢的冷却可能使细胞承受长时间的渗透压应力。最佳方法是控制速率冷冻, 通常速率约为每分钟-1°C[2]. 这种方法确保了受控的冰晶形成，有助于保持细胞完整性。以每分钟-1°C的速度进行控制速率冷冻 以每分钟-1°C的速度逐渐冷却细胞是保持细胞在冷冻保存过程中活力的标准做法。这个速率允许细胞外冰先形成，当与二甲基亚砜（DMSO）或甘油等冷冻保护剂结合时，创造一个稳定的渗透环境。一旦温度降至-130°C以下，细胞内的分子活动显著减缓，从而减少生物老化 [2]. 为了获得最佳效果，请确保以下几点： 细胞应处于对数生长期，且至少有90%的活力 . 在使用前，将含有7.5–10%...
高通量CRISPR筛选正在通过实现精确的基因改造来提高细胞系性能，从而改变培养肉行业。以下是您需要了解的内容： 关键挑战: 培养肉生产需要能够高效生长、抵抗衰老并分化为肌肉和脂肪组织的细胞系。 CRISPR的作用: 通过同时靶向数千个基因，这些平台识别出能够增强生长、延缓衰老并支持分化的基因编辑。 显著发现: 研究表明，在TP53和 PTEN基因在 牛间充质干细胞中敲除可以在30天内将增殖提高至1000倍，并将其寿命从100天延长至200天。 应用: CRISPR工具如敲除筛选、CRISPRi和CRISPRa被用于优化细胞生长、调节基因表达，并平衡增殖与分化。 行业工具: 先进技术如RMCE、RNA-seq和单细胞平台将CRISPR结果与多组学数据整合，确保精确且可扩展的改进。 对于生物工艺工程师和研发专业人员，这些创新解决了在扩大培养肉类工艺时的关键瓶颈，同时保持细胞质量和功能。CRISPR与自动化系统和定制资源的整合，如 Cellbase，进一步加速了工业可行性。CRISPR-Cas9 基因组范围敲除筛选的基础知识 CRISPR-Cas9 在大规模基因编辑中的工作原理 CRISPR-Cas9 系统依赖于与单导向 RNA (sgRNA) 配对的 Cas9 核酸酶来靶向特定的 DNA 序列。一旦 sgRNA 将 Cas9...
对于管理生物安全废物的培养肉专业人士来说，关键是：适当的消毒可以降低微生物风险，确保符合英国法规，并保护您的设备。从废弃培养基等液体生物危害到使用过的个人防护装备等固体废物，选择合适的消毒剂至关重要。微生物抗性、有机负荷和材料兼容性等因素都影响效果。 关键要点： 微生物目标：根据微生物类型选择消毒剂。例如，孢子需要比营养细菌更强的试剂。 有机物质：高细胞碎片或蛋白质含量会降低消毒剂性能。始终在使用消毒剂前预先清洁表面。 材料兼容性：氯会腐蚀金属；酒精挥发快。将消毒剂与您的设备和表面相匹配。 验证： 定期使用生物指示剂测试过程 ( 嗜热脂肪芽孢杆菌) 以达到无菌保证水平 (10⁻⁶)。 法规： 遵循英国标准，包括湿热高压灭菌（121°C，15 psi，20–30 分钟）进行废物处理。 化学品选择快速提示： 漂白剂（次氯酸钠）： 广谱但具有腐蚀性；适用于溢出物但不适用于敏感设备。 70% 乙醇： 对表面清洁有效，但不适用于孢子或大量溢出物。 过氧乙酸： 广谱且腐蚀性较小，但易燃。 季铵化合物（Quats）： 对设备安全，但仅限于营养细菌。 酚类： 在有机负载下效果良好，但可能有毒。 专业提示： 始终查阅化学品安全数据表 (MSDS)...
培养基是培养肉生产中最大的单项成本，占总生产费用的55%–95%。最大的成本来源是生长因子，如FGF-2和TGF-β，在某些配方中可占培养基成本的98%。由于其复杂的生产过程和短暂的稳定性，这些蛋白质价格昂贵。基础培养基、重组蛋白和补充剂也增加了成本，但程度较小。 关键见解包括： 生长因子主导成本: 在无血清配方中可占培养基费用的99%。 基础培养基节省: 改用食品级成分可将成本降低约82%。 生产方法很重要: 诸如培养基回收、营养回收和稳定生长因子等技术有助于减少消耗。 削减成本策略: 通过扩大生长因子的生产规模与E.coli, 分子农业和无细胞系统是有前景的方法。 像Cellbase这样的采购工具通过提供培养肉特定产品来简化采购，确保兼容性并减少延误。降低成本将需要优化配方、替代采购和改进生产方法的结合。 培养肉生产的生长培养基成本分解 生长培养基的主要成本组成部分 生长因子：最大的成本 生长因子在培养肉生产中的费用占据主导地位，占制造成本的55%到95%，在特定配方中占培养基成本的99%。例如，在Essential 8培养基中，几乎98%的成本来自FGF-2和TGF-β[2]. 生长因子的高成本与其复杂的生产要求有关。这些蛋白质需要精确的折叠和翻译后修饰 - 如糖基化、磷酸化和二硫键形成 - 才能正常发挥功能。通常，这需要使用昂贵的哺乳动物细胞系统，如中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞 [1]. 它们的不稳定性增加了另一层困难；由于半衰期从几分钟到几天不等，通常需要高浓度来抵消在生物反应器中的快速降解[1]. 虽然生长因子占据了成本的大头，但基础培养基和重组蛋白在整体成本结构中也起着重要作用。基础培养基和重组蛋白 基础培养基提供细胞代谢所需的基本营养，包括氨基酸、维生素、葡萄糖和无机盐[2]. 与生长因子相比，这些成分对总成本的贡献要小得多。例如，在未优化的牛卫星细胞培养基配方中，基础培养基仅占成本的3.7%，而生长因子和重组蛋白占91.3%[3]. 然而，在优化的配方中，当生长因子的费用减少时，基础培养基可以占到总成本的47.1%[3]....
微生物污染是培养肉生产中的一个关键挑战。生物反应器为细胞生长提供了理想的条件，但也为细菌、真菌和病毒的繁殖创造了机会。早期检测污染对于防止生产损失、确保安全和符合监管标准至关重要。以下是主要检测方法的快速概述： 基于培养的技术: 成本效益高且简单，但速度慢，仅限于可见污染物如细菌和真菌。 PCR（聚合酶链式反应） : 高度敏感和精确，适合检测病毒和支原体，但不适合实时使用。 免疫测定法: 有效识别毒素和特定污染物，但需要手动采样和处理。 光谱传感器: 实时、连续监测微生物副产物，但它们仅检测间接指标。 流式细胞术: 提供细胞群体的详细分析，但更适合定期检查而非连续监测。 每种方法都有其优缺点，结合使用通常能提供最佳结果。像AI驱动传感器和一次性系统这样的先进工具也在帮助改善检测并降低大规模操作中的风险。下面，我们将深入探讨这些方法的工作原理及其在培养肉生产中的作用。 1. 基于培养的技术 基于培养的检测仍然是发现培养肉生物反应器中微生物污染的经典方法。概念很简单：微生物繁殖直到它们使培养基变得明显浑浊。这种浑浊是由大多数细菌、酵母和真菌引起污染的明确指示 [1]. 但这里有个问题——这种方法有其局限性。根据FSA研究和证据：“虽然大多数细菌、酵母和真菌会使培养基变得浑浊，因此在培养中容易检测到，但病毒、分枝杆菌和支原体太小，不会引起浑浊，这意味着需要进行测试才能检测到它们” [1]. 特别是支原体，是培养肉生产中的一个臭名昭著的问题。它不仅常见，而且难以消除，并且完全绕过了通过目视检查的检测。 检测时间 基于培养的方法最大缺点之一是检测污染所需的时间。该过程依赖于污染物的生长速度，这意味着只有当菌落生长到足够可见时才能检测到。这种延迟可能从几小时到几天不等。当浑浊度变得明显时，污染可能已经显著扩散。与在线实时监测传感器, 相比，这种方法要慢得多。 灵敏度 虽然这些方法非常适合识别快速生长的需氧细菌，但在处理不会引起浑浊的污染物时效果不佳。检测需要大量的微生物负荷，这使得它在识别低水平污染时效果较差。相比之下，分子方法，如PCR，可以通过直接靶向遗传物质来检测甚至微量的污染。 实时使用的适用性 基于培养的技术根本不适合实时监测。FSA研究和证据强调了实时工具的重要性，指出“在线实时处理监测微生物生长参数（e.g. ，pH，溶解氧）将有助于早期检测污染”[1]. 在培养肉生产的背景下——安全性和成本效率都至关重要——这种延迟限制了基于培养的方法只能作为辅助角色，而不是前线防御。 接下来，我们将探讨提供更快和更灵敏检测的分子技术。...
培养肉的生产依赖于完美平衡蛋白质、脂肪和碳水化合物，以复制传统肉类的味道、质地和营养成分。 早期产品缺乏这种平衡，常常导致干燥或平淡的结果。像 Aleph Farms这样的公司已经取得了进展，通过结合肌肉和脂肪细胞培养，达到了更接近传统牛肉的宏量营养素配置。这个过程涉及代谢工程、基因编辑（ e.g. ，CRISPR）和无血清培养基以优化细胞生长和营养合成。 关键要点： 蛋白质: 对肌肉细胞结构和质地至关重要。 脂肪: 对风味、嫩度和大理石纹理至关重要。 碳水化合物: 为细胞生长提供能量，并在烹饪过程中增加风味。 像HPLC和质谱这样的工具有助于测量常量营养素水平，而生物反应器设计则确保在大规模生产过程中的一致性。英国和美国的法规要求培养肉在常量营养素组成上与传统肉类的差异不超过10%。预计到2030年市场价值将达到250亿英镑，实现这些标准对于商业成功至关重要。 工程细胞系用于培养肉和可持续细胞农业 #culturedmeat sbb-itb-ffee270常量营养素在培养肉生产中的功能 常量营养素在培养肉生产中的功能和关键指标 常量营养素在塑造培养肉以类似传统牛肉、猪肉或家禽方面发挥着不同的作用。蛋白质提供结构， 脂肪增强风味和嫩度，而 碳水化合物为能量密集的细胞生长过程提供燃料。 无血清培养基中氨基酸、脂质和葡萄糖的平衡直接影响最终产品的营养成分和组成 [1]. 肌肉细胞发育中的蛋白质 蛋白质对于构建肌肉细胞至关重要。它们推动细胞生长、分裂和肌纤维的成熟，这对于实现肉的理想质地和“咬感”至关重要[1][2]. 基于蛋白质的支架——如胶原蛋白、明胶或植物提取物——作为框架，帮助细胞对齐并形成结构化的3D组织，复制传统肉类的纤维质地[2]. 在烹饪过程中，肌球蛋白重链等蛋白质在超过50°C的温度下变性，形成我们与熟肉相关的紧实质地[5]. 研究表明，在培养基中添加100 ng/mL的类胰岛素生长因子（IGF-1）可以使肌母细胞数量增加66%[2], 这突显了精确的蛋白质管理如何支持肌肉发育。有趣的是，实验表明，高度分化的肌肉组织中含有的苯甲醛（一种与风味相关的化合物）是未分化样本的三倍[5]....
