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Defined Bioscience

Defined Bioscience HiDef® PBS/EDTA細胞解離試薬

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Defined Bioscience’s HiDef® PBS/EDTA細胞解離試薬は、接着細胞の穏やかで一貫した剥離のための定義された、タンパク質フリーのフォーミュレーションです。これは、細胞表面タンパク質を損なうことなく、また生存率を損なうことなく、ルーチンの集合体パッセージングや単一細胞の解離を可能にし、多能性幹細胞、一次細胞、その他の敏感な接着培養に適しています。

この試薬は、カルシウムやマグネシウムを含まないダルベッコのリン酸緩衝生理食塩水（DPBS）で構成されており、生理的pH 7.4で0.5 mM EDTAを補充しています。この組成は、機能性を保持しながら、ストレスを軽減し、形態を維持しつつ、キレート作用を通じて細胞の剥離を促進します。HiDef PBS/EDTAは、トリプシン化などの酵素消化の前の準備洗浄ステップとしても使用できます。

各ロットは、信頼性のある剥離と回収を確認するために、HiDef® B8培地で培養されたヒト誘導多能性幹細胞（iPSCs）を使用して検証されています。無菌の125 mLボトルで1×濃度で供給されるこの試薬は、2–30 °Cで最大18か月間保存できます。高い継代後の生存率が必要で、細胞生理に最小限の影響を与えるアプリケーションに対して、コスト効果の高い酵素不使用の代替品を提供します。

研究開発用のみ。人間または診断用途には使用できません。

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  • How to Qualify Cultivated Meat Staff for GMP Standards

    GMP基準に適合する培養肉スタッフの資格要件

    培養肉のスタッフがGMP基準を満たすことは、製品の安全性、規制の遵守、スムーズな生産にとって不可欠です。 このプロセスには、ターゲットを絞ったトレーニング、能力評価、徹底した文書化が必要です。以下はその始め方です: 基礎トレーニング: スタッフにGMPの原則、衛生プロトコル、無菌技術、汚染防止を教えます。 役割別トレーニング: バイオリアクターの操作や品質管理など、異なる職務に合わせたプログラムを作成します。 能力評価: 筆記テストや実技評価を使用して知識とスキルを確認します。 文書化: 詳細なトレーニングログと監査対応の記録を維持し、規制の遵守を確保します。 継続的なトレーニング: 定期的な再資格取得と規制変更に関するトレーニングの更新をスケジュールします。 トラッキングシステム: 資格および再資格取得の期限を監視するためのデジタルツールを実装します。 構造化されたプログラムと適切な監督により、汚染や細胞株の不安定性などのリスクを最小限に抑え、規則 (EC) 853/2004. を含む規制要件を満たすことができます。 GMP基準に適合する培養肉スタッフを資格付けするための5ステッププロセス GMPとは？ | 食品業界における適正製造基準 | SafetyCulture ステップ1: GMPトレーニングプログラムを設計する 構造化されたトレーニングプログラムの作成は、すべてのスタッフが役割に関係なく理解しなければならないGMPの基本原則から始まります。 GMPSOP, 初期トレーニングには、基本的な規制、健康と衛生の実践、文書化プロセス、GMPコンプライアンスを支えるコアバリューが含まれるべきです[5]. 培養肉施設の場合、この基盤には、スターターマテリアルの調達から製造、試験、保管、流通に至るまで、無菌技術と汚染防止も組み込まれている必要があります[3]....

  • Quality Control for Genetic Stability in Cell Lines

    細胞株における遺伝的安定性の品質管理

    培養肉の生産において、遺伝的安定性は非常に重要です。これがなければ、細胞株が変異し、品質の不一致、安全性のリスク、生産の失敗を引き起こす可能性があります。数千から数兆の細胞にスケールアップすることで、これらのリスクが増幅され、堅牢な品質管理システムが不可欠となります。FDAや EMAのような規制当局は、製品を承認する前に安定性の証明を要求します。なぜなら、わずかな遺伝的変化でもアレルギー反応や有害な結果を引き起こす可能性があるからです。 主な課題には、遺伝的ドリフト、変異の蓄積、癌遺伝子の活性化が含まれます。これらの問題は、細胞の継代培養、選択圧、そして生産中の環境ストレスから生じます。核型分析、SNPアレイ、次世代シーケンシング（NGS）などの高度な試験方法は、これらのリスクを検出し対処するのに役立ちます。構造化された細胞バンキングや標的遺伝子工学のような予防戦略は、不安定性に対するさらなる安全策となります。生産者は、セルバンキングから大規模なバイオリアクターに至るまで、すべての生産段階で品質管理を統合する必要があります。STRプロファイリング、汚染テスト、機能アッセイなどのツールは、一貫性と安全性を確保します。Cellbaseのようなプラットフォームは、生産者が厳しい業界基準を満たすためのリソースとつながることを可能にします。遺伝的安定性は単なる規制要件ではなく、信頼性が高くスケーラブルな培養肉生産の基盤です。 DNAからマスターセルバンクまでの細胞株開発の加速 - AGC Biologics 遺伝的安定性を維持する際の一般的な課題 培養肉の生産サイクル全体で遺伝的安定性を確保することは容易ではありません。生産の規模が大きいほど、遺伝的変化が発生し広がる機会が増えます。これらの課題を認識することは、効果的な品質管理システムを導入するための鍵です。遺伝的浮動と突然変異の蓄積 拡張された細胞継代は、培養肉生産におけるゲノム不安定性の主要な原因です。不死化細胞株は、その性質上、ゲノムの変化を起こしやすく、長期培養中に自発的な突然変異を引き起こす可能性があります[6][5]. 細胞が複数回の集団倍加を経ると、DNA複製のエラーが蓄積し、多様な細胞集団が形成され、機能喪失の可能性があります。BioPharm Internationalのクリストファー・フライとルホン・ヒーはこの問題を強調しています: クローン由来のCHO細胞株は、長期間のサブカルチャーを経て、しばしば異なる異質な集団になることが観察されています[6]. 産業環境では、約20%の生産細胞株が世代を重ねるごとに顕著なトランスジーンの不均一性を示します[6]. これらの突然変異は、トランスフェクション後のDNA複製中や、外来遺伝子が宿主ゲノムに統合される際のエラーにより、早期に発生する可能性があります[5]. 選択圧は複雑さをさらに増します。細胞株を安定化させるために使用される抗生物質や代謝マーカー（e.g. 、MTX）などのエージェントは、実際には突然変異率を増加させる可能性があります[6][5]. 場合によっては、これらのエージェントの濃度が高いほど、突然変異率も高くなります[6]. 栄養不足、スケールアップ中の最適でない培養条件、拡大による物理的ストレスなどの環境ストレッサーは、遺伝的完全性をさらに不安定にする可能性があります[6][5]. html 細胞株開発ディレクターのShuai Wang氏、WuXi Biologics, は次のように述べています: 変異レベルは、チャイニーズハムスター卵巣（CHO）細胞のゲノムの可塑性のために、細胞の継代中に変化する可能性があります[5]. エピジェネティックな変化も役割を果たします。トランスジーンは、培養プロセス中に部分的または完全に失われたり、サイレンシングされたりすることがあり、長期的な安定性に影響を与えます。これらの蓄積された変異は、細胞機能を損なうだけでなく、癌遺伝子の活性化リスクを増加させます。 癌遺伝子活性化のリスク 癌遺伝子の活性化は、培養肉の生産者にとって重大な安全性の懸念を表しており、全生産バッチを危険にさらす可能性があります。遺伝的不安定性は、ハイパーメチル化のようなメカニズムを通じて癌遺伝子の活性化を引き起こし、腫瘍のようなプロファイルをもたらす可能性があります[3][1]. 生産における急速な拡大は、これらの有害な突然変異を蓄積する可能性をさらに高めます[5][6]. これはよく認識されている課題です。国際イノベーションコンソーシアム&...

  • Analytical Tools for Monitoring Serum-Free Adaptation

    血清不使用適応の監視用分析ツール

    細胞を血清不使用培地（SFM）に移行することは、倫理的でスケーラブルな培養肉生産にとって重要です。 このプロセスは動物由来の血清を排除し、汚染リスクを減らし、細胞成長のための一貫した環境を確保します。しかし、栄養素の枯渇、代謝の変化、細胞の生存率の維持といった課題も伴います。フローサイトメトリー、メタボロミクス、トランスクリプトミクスなどのモニタリングツールは、細胞の健康状態、栄養素の使用、遺伝子発現の変化を追跡することで、これらの課題を乗り越える上で重要な役割を果たします。 重要なポイント: なぜ重要か: SFMは一貫性を確保し、汚染リスクを減らし, 倫理基準に合致します。 課題: SFMの細胞は、pH変化、栄養素の枯渇、機械的力などのストレス要因に敏感です。 モニタリングツール: フローサイトメトリー: 細胞の生存率とアポトーシスマーカーを追跡します。 メタボロミクス: 栄養素の消費と代謝の変化を分析します。 トランスクリプトミクス: 主要な経路における遺伝子発現の変化を調べます。 アプリケーション: これらのツールからのデータは、培地の配合, を精緻化し、コストを削減し、細胞の成長を改善します。 クイックインサイト: HPLC、質量分析、リアルタイムセンサーのようなツールは、血清フリー移行を最適化するための実用的なデータを提供します。Cellbaseのようなプラットフォームは、これらのツールと培地へのアクセスを簡素化し、培養肉の研究をサポートします。 無血清培養：なぜ、そしてどのように？（2022年2月） sbb-itb-ffee270無血清適応のための分析ツール 無血清細胞適応を監視するための3つの主要な分析ツール 細胞健康評価のためのフローサイトメトリー フローサイトメトリーは、無血清適応中の細胞の生存率と全体的な健康状態を迅速に評価するための強力なツールです。適応プロセスを成功させるためには、高い細胞生存率を維持することが重要です[1]. この方法はまた、アポトーシスマーカーを検出し、細胞サイズの変化を追跡します。例えば、研究によると、懸濁適応したHEK293細胞は、付着性の細胞と比較して平均約2.31 pLと大きな体積を持つ傾向があります[1]. このような洞察は、適応中の細胞の挙動をより明確に理解するのに役立ちます。これを超えて、メタボロミクスは、これらの変化の根底にある代謝の変化をより深く探ります。 細胞代謝分析のためのメタボロミクス メタボロミクスは、栄養素の使用と代謝産物の生成を分析することに焦点を当てており、無血清適応中の細胞代謝の詳細なビューを提供します。HPLCや質量分析法のような技術は、栄養素の消費パターンと代謝産物の出力を特定するために非常に貴重です。これらの発見は、効率を高め、コストを削減するための培地の調整に不可欠です...

  • Analytical Tools for Bioreactor Cleaning Validation

    バイオリアクター洗浄バリデーションのための分析ツール

    培養肉の生産における洗浄バリデーションは、汚染を防ぎ、製品の安全性を確保するために重要です。 知っておくべきことは以下の通りです: 規制基準: 洗浄プロセスは微生物を99%除去し、その後の消毒または滅菌で99.999%の減少を達成する必要があります。 残留物の課題: バイオリアクターはタンパク質、脂肪、細胞の破片を蓄積し、正確な洗浄方法が必要です。使い捨てシステムは炭化水素やシロキサンのようなリスクを追加します。 残留物検出のための主要ツール: HPLC: 特定の残留物を検出しますが、微量汚染物質に対する感度に限界があります。 LC-MS/MS: 非常に高感度で、ng/mLレベルを検出し、微量分析に最適です。 TOC分析: すべての有機残留物を迅速に測定します（ppb感度）ですが、特異性に欠けます。 微生物検出: 従来の無菌試験は遅く（5～7日）かかります。ATPバイオルミネッセンスやリアルタイムPCRのような迅速な方法は、結果をより早く提供し、バッチリリースのタイムラインを改善します。 デジタルモニタリング: UV分光法やAI駆動の分析などのリアルタイムツールは、洗浄サイクルを最適化し、ダウンタイムを削減し、効率を向上させます。 洗浄プロセスを検証するための新しい分析方法 残留物検出ツール 培養肉の生産において、バイオリアクターの洗浄は細心の注意を要するプロセスです。タンパク質、脂肪、細胞の破片、培地成分などの残留物は、交差汚染を避けるために完全に除去されなければなりません。HPLC、LC-MS/MS、TOC分析のようなツールは、それぞれ徹底的な残留物検出を保証し、定量的および定性的な洞察を提供する役割を果たします。高速液体クロマトグラフィー (HPLC) HPLCは、バイオリアクター内の残留物を測定するために広く使用されている方法です。紫外線 (UV) 検出と組み合わせることで、液体サンプル中の成分を分離し識別するのに役立ちます。これにより、特定の培地成分や洗浄剤などの安定した残留物を定量化するのに特に有用です。しかし、限界もあります。例えば、HPLC-UVは微量の残留物を検出するのに十分な感度を持たない場合があり、特に吸着損失を起こしやすい高効力ペプチドやUV感度が低いものを含むアプリケーションでは問題となります[3]. 通常、HPLC-UVはµg/mL範囲での検出限界を達成しますが、微量の汚染を監視するには不十分な場合があります。それでも、特定の残留物の除去を検出し検証する信頼性があるため、培養肉プロセスにおける製品の安全性を確保するための主要な方法となっています[3]. 質量分析技術 LC-MS/MSは、その高い感度と特異性で残留物検出を次のレベルに引き上げます。この方法は、幅広いペプチドを分析し、1–1,000 ng/mLの量を単一のランで検出できます。複数の反応モニタリングフラグメントを使用することで、残留物の同定を正確に確認します。Waters Corporation: によると...

  • Cold Chain Packaging for Cultivated Meat Distribution

    培養肉配送用コールドチェーン包装

    コールドチェーン包装は、培養肉を流通中に安全で高品質に保つために重要です。このタイプの肉は温度変化に非常に敏感であり、腐敗、微生物の増殖、汚染を防ぐために厳格な管理が必要です。冷蔵製品は0–4°Cの間に保たれ、冷凍製品は–18°C以下である必要があります。適切な包装と監視がなければ、製品は安全でなくなり、販売できなくなるリスクがあります。 主なポイントは以下の通りです: 断熱オプション: 発泡スチロール（EPS）は手頃な価格ですが、環境に優しくありません。ポリウレタン（PUR）は再利用可能な包装においてより優れた性能を提供し、真空断熱パネル（VIP）はその優れた断熱性により長距離輸送に最適です。 温度管理: ジェルパックは短距離輸送に適しており、相変化材料（PCM）は長時間の正確な管理を保証し、ドライアイスは超低温に不可欠です。 規制: 英国およびEUの法律は、HACCP計画と監視システムを必要とし、衛生および温度基準の厳格な遵守を要求しています。 持続可能性: 生分解性材料（羽毛繊維マットなど）や再利用可能な容器のような代替品は、コールドチェーン物流における廃棄物を削減しています。 培養肉の生産者にとって、適切な断熱、温度管理、および監視システムを組み合わせることは、コンプライアンス要件を満たし、環境問題に対処しながら、安全な配送を確保します。 コールドチェーンとは？ コールドチェーン包装のための断熱材 培養肉流通のためのコールドチェーン包装材料の比較 輸送中に培養肉の品質を保持するためには、適切な断熱材の選択が重要です。市場には、熱性能、コスト、環境への配慮に関してそれぞれ異なる特徴を持つ3つの主要な選択肢があります。 発泡ポリスチレン（EPS）フォームは、手頃な価格と信頼性のある断熱特性により、最も一般的に使用されている断熱材です。98%が空気で、わずか2%が原材料で構成されています[6]。EPSのR値は1インチあたり3.6から4.0の範囲です [7]。短距離でコストに敏感な出荷には理想的な選択肢です。しかし、そのリサイクルの難しさと環境への影響により、EU包装および包装廃棄物規則で概説されているような規制の制限が増加しています[2]。 ポリウレタン（PUR）フォームは、EPSと比較して優れた熱抵抗と構造的耐久性を提供します。その薄い壁で効果的な温度管理を提供する能力により、再利用可能な配送システムの人気の選択肢となっています。初期費用は高いですが、その耐久性と複数回の使用に適していることが、時間とともに費用を相殺することができます[4]. 真空断熱パネル (VIPs) は、コールドチェーン断熱の最上位オプションです。真空を通じて伝導と対流を排除することで、VIPsはEPSの5倍から10倍の断熱性能を提供します[4]。この効率性により、包装の壁を薄くすることができ、ペイロード容量が増加します。これは、高価値の培養肉製品を長距離輸送するための重要な機能です。例えば、2025年7月に、あるグローバル製薬会社がmRNAワクチンの輸送に真空断熱ボックスをテストしました。 この試験では、断熱材の厚さを50％削減し、2,000件の出荷で温度偏差ゼロを達成しました [2][7]。VIPは最も高価な選択肢ですが、厳密な温度管理が必要な長距離輸送（冷蔵品は0–4°C、冷凍品は–18°C）には不可欠です。 材料 熱性能 コスト 最適な用途 EPSフォーム 中程度 (R...

  • Cell Line Selection: Bovine vs Porcine

    細胞株の選択: ウシ vs ブタ

    培養肉の生産において、ウシ細胞株とブタ細胞株のどちらを選ぶかは重要な決定です。各細胞タイプは、スケーラビリティ、培地の要件、構造化された肉製品の作成能力に影響を与える独自の利点と課題を提供します。以下はその概要です: ウシ細胞株は、特にステーキのような製品の筋肉組織の生産に適しています。霜降りに優れていますが、長期的な分化に課題があり、スケーラビリティのために遺伝子改変が必要です。 ブタ細胞株は脂肪生産に理想的で、自発的な不死化と数百回の倍加にわたる安定した成長を示します。大規模生産においてコスト効果が高いですが、筋肉細胞との共分化には正確なタイミングが必要な場合があります。 クイック比較 属性 ウシ細胞株 ブタ細胞株 倍加時間 約39時間（初期継代） 20–24時間（初期継代） 不死化 遺伝子改変が必要 自然発生的 分化 初期は強いが、約25倍加後に低下 安定した脂肪生成効率（>200倍加） 培地コスト 組換え成長因子により高い ヘム補充培地で低コスト 構造化肉の適合性 霜降りと筋肉-脂肪分離に適している 脂肪-筋肉の共分化に効果的 両方の細胞株には独自の強みと制限があり、選択は製品の目標と生産戦略に依存します。 培養肉生産のためのウシ対ブタ細胞株の比較 ウシ細胞株 培養肉への応用 ウシ細胞株は、ステーキやその他の高級カットのような構造化された肉製品の生産に特に適しています。彼らの際立った特徴の一つは、本物の霜降りを発達させる能力です - 牛肉の独特の風味と食感の原因となる筋肉内脂肪。この霜降りは、筋肉成分を形成するウシ衛星細胞（BSCs）と、天然のウシ皮下脂肪とほぼ同一の脂肪酸プロファイルを持つ脂肪を生成する 線維脂肪前駆細胞（FAPs）の役割を通じて達成されます[2]....

  • Top 5 Bioreactor Automation Tools for Scaling Production

    生産拡大のためのトップ5バイオリアクター自動化ツール

    培養肉の生産を拡大するには、複雑な生物学的プロセスを管理し、一貫性を確保し、コストを削減するために正確な自動化が必要です。自動化により、バッチ時間を57%短縮し、効率を向上させ、年間1ユニットあたり最大£240,000を節約できます。250,000リットルを超えるバイオリアクターでは、手動プロセスはもはや実行可能ではありません。ここでは、この変革を推進する主要なツールを簡単にご紹介します: JBT READYGo Bioreactor: 20リットルから20,000リットルまでのスケールで、既存のシステムと統合し、自動洗浄と滅菌機能を備えています。 Rockwell PlantPAx 5.0: 500リットル以上のバイオリアクターをサポートし、リアルタイムモニタリング、リモートコントロール、事前プログラムされたレシピを提供します。 GEA Axenic Product Lines : 培養肉用に特別に設計されており、デジタルシミュレーションを使用して大規模生産を最適化します。 Stämm バイオプロセッサー : 長期運用が可能なモジュラー式の連続システムで、介入を最小限に抑えます。 Cellbase マーケットプレイス : バイヤーとサプライヤーを結びつけ、バイオリアクター用のカスタマイズされた自動化ツールとセンサーを提供します。 自動化により、pH、酸素、栄養分配などの変数を正確に制御し、大規模でコスト効率の高い生産を可能にします。以下では、これらのツールが培養肉製造の未来をどのように形作っているかを探ります。 培養肉生産のためのバイオリアクター自動化ツールトップ5比較 1.JBT CorporationのREADYGo バイオリアクター 商業用培養肉生産のためのスケーラビリティ READYGo...

  • ISO 14644 Monitoring: Best Practices

    ISO 14644モニタリング: ベストプラクティス

    ISO 14644 は、 培養肉生産システムを使用する産業にとって重要なクリーンルームの空気品質の基準を設定しています。ガイドラインは、粒子限界、監視戦略、および汚染制御方法をカバーしています。知っておくべきことは次のとおりです: ISO 14644-1: 粒子数に基づいて清浄度クラス（ISO 1からISO 9）を定義します。例えば、ISOクラス5は3,520個の粒子（≥0.5 µm/m³）を許可します。 ISO 14644-2: リスクベースの監視に焦点を当て、「静止時」と「運転時」の条件でのコンプライアンスを確保します。 主要指標: 粒子数、圧力差（10–15パスカル）、温度（18–22°C）、湿度（30–60%）を監視します。 方法: 光散乱式浮遊粒子カウンター（LSAPC）、微生物空気サンプリング、および表面テストを使用して汚染を検出します。 自動化: 連続監視システムはリアルタイムデータを提供し、FDA 21 CFR Part 11のような規制基準へのコンプライアンスを向上させ、リスクを低減します。 適切な監視は汚染を防ぎ、製品を保護し、クリーンルーム基準へのコンプライアンスを確保します。 ISO 14644 クリーンルーム分類基準と主要監視パラメータ リスクベースの監視計画の作成 リスク評価の実施 クリーンルームの監視に関しては、リスクベースのアプローチを取ることで、監視プロセスが実際の運用条件に密接に一致することを保証します。これは一般的なテンプレートに従うことではなく、環境の特定のリスクに計画を合わせることです。ISO...