Proliferum® P

Proliferum P ist ein serumfreier Ersatz ohne tierische Bestandteile, der für die Kultur von aus Schweinefett gewonnenen Stammzellen entwickelt wurde. Es behebt die Einschränkungen von fötalem Kälberserum, indem es eine definierte und skalierbare Alternative bietet, die für die Entwicklung von kultiviertem Fleisch geeignet ist. Das Produkt wird als ein Panel von drei verschiedenen Formulierungen geliefert, die jeweils eine leicht unterschiedliche Zusammensetzung bieten, um eine vergleichende Optimierung zu unterstützen. Dies ermöglicht es den Produzenten, die Formulierung zu identifizieren, die die Proliferation und Differenzierung innerhalb ihrer spezifischen Zelllinien und Kultursysteme am besten unterstützt.

Die Formulierungen wurden an immortalisierten und spontan immortalisierten Schweine-Adipozyten-abgeleiteten Stammzellmodellen (piADSCs und psiADSCs) evaluiert. Über fünf Passagen hinweg zeigten Zellen, die mit Proliferum P kultiviert wurden, Verdopplungszeiten, Morphologie und Lebensfähigkeit, die mit Kulturen vergleichbar sind, die mit 10 Prozent FBS ergänzt wurden.Differenzierungsassays bestätigten normales adipogenes Verhalten, und Live-Dead-Färbung zeigte ein robustes Überleben sowohl in adhärenten als auch in mikroträgerbasierten Arbeitsabläufen. Diese Daten zeigen, dass alle drei Varianten eine zuverlässige Leistung in statischen und Suspensionskulturformaten bieten.

Proliferum P wird steril und gefroren geliefert und sollte bei −20 °C mit minimaler Lichteinwirkung gelagert werden. Zum Erhalt der Stabilität wird das Auftauen bei Raumtemperatur empfohlen. Nach dem Auftauen wird das Produkt in ein Basalmedium wie DMEM/F12 auf eine Arbeitskonzentration von 1–2× verdünnt, wobei eine Titration empfohlen wird, um das optimale Verhältnis für jedes Zellsystem zu bestimmen. Das vollständige Medium sollte innerhalb von ein bis zwei Wochen verwendet und alle achtundvierzig Stunden ausgetauscht werden. Beim Übergang von serumhaltigen Systemen unterstützen die Formulierungen entweder einen direkten Wechsel oder eine schrittweise Anpassung über drei Passagen.

Multus empfiehlt, alle drei Formulierungen während der anfänglichen Optimierung zu evaluieren, da zellspezifische Reaktionen die Leistung unter verschiedenen Bedingungen beeinflussen können.