DMEM vs F12 for Cultivated Meat Cell Lines
For cultivated meat R&D teams, I’d screen DMEM, Ham’s F12 and a 1:1 DMEM/F12 mix before choosing a basal medium. None is complete on its own: your cell line, supplements...
ข้อมูลเชิงลึก & ข่าว
-
สื่อที่กำหนดสูตรสำหรับการดูแลรักษาเซลล์ต้นกำเนิดพลูริโพเทนท์
หากการบำรุงรักษา PSC กำลังเบี่ยงเบน สื่อกลางมักเป็นส่วนหนึ่งของปัญหา สำหรับวิศวกรกระบวนการชีวภาพ นักวิทยาศาสตร์เพาะเลี้ยงเซลล์ และทีมวิจัยและพัฒนาเนื้อสัตว์ที่เพาะเลี้ยง คำตอบสั้น ๆ คือ: รักษาระบบการบำรุงรักษาให้ชัดเจน รักษาเวลาการให้อาหารให้คงที่ และตรวจสอบความสามารถในการเปลี่ยนแปลงและความเสถียรตามตาราง QC ที่กำหนดไว้& ฉันจะสรุปบทความนี้เป็นสี่ประเด็น: การกำหนดหมายถึงมากกว่าการปราศจากเซรั่ม ในการเพาะเลี้ยง PSC การกำหนดทางเคมี, ปราศจากแหล่งกำเนิดจากต่างประเทศ, ปราศจากฟีดเดอร์, และ ปราศจากส่วนประกอบจากสัตว์ แต่ละอย่างจะขจัดแหล่งที่มาของความแปรปรวนที่แตกต่างกันออกไป การตั้งค่าหลักนั้นง่าย: ฐาน DMEM/F-12 การสนับสนุน ITS...
-
7 แนวทางการใช้ร่วมสำหรับกระแสของเสียจากสื่อ
หากคุณทำงานเกี่ยวกับการออกแบบกระบวนการผลิตเนื้อสัตว์ที่เพาะเลี้ยง สื่อที่ใช้แล้วไม่ใช่แค่กระแสของเสียเท่านั้น ฉันจะถือว่ามันเป็นกระแสด้านที่ขับเคลื่อนด้วยองค์ประกอบที่สามารถไปใน เจ็ดทิศทางที่แตกต่างกัน: การกู้คืนสารอาหาร การแยกส่วนกรดอะมิโน การกู้คืนเกลือและแร่ธาตุ การนำกลับมาใช้ใหม่ของน้ำ การแปลงวัตถุดิบ การป้อนข้อมูลการหมักทุติยภูมิ หรือการเปรียบเทียบเชิงวิเคราะห์ นี่คือเวอร์ชันสั้น: เส้นทางที่ถูกต้องขึ้นอยู่กับสิ่งที่เหลืออยู่ในสื่อหลังการเพาะเลี้ยง วิธีการทำงานของเครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพ และความจำเป็นในการทำความสะอาดกระแสก่อนการนำกลับมาใช้ใหม่หรือการแปลง การทำงานแบบแบทช์และการป้อนแบบแบทช์มักจะเหลือแลคเตทสูง แอมโมเนีย ของแข็ง การลอยตัวของออสโมลาลิตี้ และการเปลี่ยนแปลงของค่า pH การไหลเวียนให้กระแสที่เจือจางมากขึ้น มักมีของแข็งต่ำกว่า แต่โดยปกติต้องการการเข้มข้นก่อนการกู้คืน สื่อที่กำหนดทางเคมีและปราศจากเซรั่มทำให้การแยกง่ายขึ้นเนื่องจากภาระโปรตีนพื้นหลังต่ำกว่า ก่อนที่ฉันจะใช้เวลาในเส้นทางใด ๆ ฉันจะตรวจสอบสี่สิ่งก่อน: ภาระสิ่งเจือปน: กรดอะมิโน,...
-
การแก้ไขยีน CRISPR เฉพาะสายพันธุ์ในเนื้อสัตว์เพาะเลี้ยง
หากฉันออกแบบจากการอ้างอิงสายพันธุ์แทนที่จะเป็นสายผู้ก่อตั้ง ฉันอาจพลาดเป้าหมายก่อนที่จะสั่งไกด์ด้วยซ้ำ สำหรับวิศวกรกระบวนการชีวภาพ นักวิทยาศาสตร์เพาะเลี้ยงเซลล์ และทีมวิจัยและพัฒนาเนื้อสัตว์เพาะเลี้ยง&จุดสำคัญคือ: ความสำเร็จในการแก้ไขขึ้นอยู่กับ สายเซลล์ที่แน่นอน ที่อยู่ตรงหน้าฉัน ไม่ใช่ชื่อสายพันธุ์บนฉลาก. ในบทความนี้ ฉันจำกัดเส้นทางการตัดสินใจให้เหลือหกข้อ: คุณภาพการประกอบจีโนม, พลอยดี, ความแปรปรวนของอัลลีล, การเข้าถึง PAM, อคติการซ่อมแซม, และการออกแบบผู้บริจาค. ซึ่งมีความสำคัญสำหรับทั้งสองคลาสการแก้ไข: การลบสามารถทนต่อความแปรปรวนในการซ่อมแซมได้มากกว่า ในขณะที่การแทรกขึ้นอยู่กับลำดับตำแหน่งและการจับคู่ผู้บริจาคมากกว่า มีจุดปฏิบัติที่โดดเด่นอยู่ไม่กี่ข้อ: จัดลำดับสายผู้ก่อตั้งก่อน, แล้วออกแบบไกด์จากลำดับนั้น นับอัลลีลทั้งหมดที่ตำแหน่ง ก่อนที่จะเรียกการลบว่าเสร็จสมบูรณ์ ตรวจสอบการเข้าถึง PAM ในแต่ละอัลลีล, ไม่ใช่แค่ในจีโนมอ้างอิงเท่านั้น....
-
เส้นทางการเพิ่มมูลค่าของเสียในเนื้อสัตว์เพาะเลี้ยง
หากคุณดำเนินการผลิตเนื้อสัตว์เพาะเลี้ยงในระดับใหญ่ การจัดการของเสียไม่ใช่แค่การกำจัด - มันคือค่าใช้จ่ายของสื่อ, ภาระน้ำ, การควบคุมการปนเปื้อน, และความต้องการด้านสาธารณูปโภค. ฉันเห็นประเด็นหลักของบทความนี้ว่าเรียบง่าย: เส้นทางที่ดีที่สุดมักจะเป็นลำดับขั้นตอน ไม่ใช่เส้นทางเดียว. เริ่มต้นด้วยกระแสที่สามารถคืนค่ามากที่สุดให้กับการผลิต จากนั้นย้ายเศษที่มีมูลค่าต่ำกว่าไปยังการฟื้นฟูน้ำหรือพลังงาน ในบทความนี้ เส้นทางทั้งห้าคือ การใช้และฟื้นฟูสื่อที่ใช้แล้ว, การฟื้นฟูสารอาหารที่เจาะจง, การแปรรูปชีวมวล, การฟื้นฟูน้ำ, และ การบำบัดแบบไม่ใช้ออกซิเจน. ตัวเลขบางตัวทำให้การแลกเปลี่ยนชัดเจน: การเพาะเลี้ยงแบบต่อเนื่องที่เปิดใช้งาน TFF มีรายงานที่ มากกว่า 20 วัน, 130 พันล้านเซลล์ต่อลิตร, และ...
-
การวิเคราะห์ลักษณะของกระแสของเสียในโรงงานผลิตเนื้อสัตว์เพาะเลี้ยง
หากคุณสุ่มตัวอย่างเฉพาะการระบายสุดท้าย คุณจะพลาดกระแสที่ขับเคลื่อนต้นทุน ภาระการบำบัด และความเสี่ยงจากน้ำเสียทางการค้า สำหรับวิศวกรกระบวนการชีวภาพและทีมเพาะเลี้ยงเซลล์ จุดเริ่มต้นที่ถูกต้องนั้นง่าย: ทำแผนที่ของเสียในแต่ละขั้นตอนของกระบวนการ แยกกระแสออกจากกัน และบันทึกข้อมูลหลักเดียวกันสำหรับทุกกระแส ฉันจะสรุปบทความนี้ว่า: ฉันต้องการ ทะเบียนของเสียแบบสด, ไม่ใช่รายงานครั้งเดียว ฉันควรทำแผนที่ของเสียตาม แหล่งที่มา: การเตรียมสื่อ, การฝึกอบรมเมล็ดพันธุ์, เครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพการผลิต, การเก็บเกี่ยว, ขั้นตอนปลายน้ำ, CIP/SIP และสาธารณูปโภค ฉันควรแยก ของเสียจากกระบวนการ, ของเสียจากการทำความสะอาด และน้ำทิ้งจากสาธารณูปโภค จนกว่าข้อมูลจะแสดงว่าพวกมันสามารถรวมกันได้ ฉันควรบันทึกพารามิเตอร์หลักเดียวกันสำหรับแต่ละสตรีม: pH, การนำไฟฟ้า,...
-
วงจรชีววิทยาสังเคราะห์สำหรับการตรวจสอบสายเซลล์
หากคุณกำลังเลือกวงจรการตรวจสอบสำหรับเซลล์เนื้อสัตว์ที่เพาะเลี้ยง คำตอบสั้น ๆ คือ: ไม่มีการออกแบบที่ดีที่สุดเพียงหนึ่งเดียว. สิ่งที่คุณเลือกขึ้นอยู่กับ ภาระของเซลล์, ความเฉพาะเจาะจงของสัญญาณ, ความเร็วในการตอบสนอง, และความสามารถในการทำงานของโครงสร้างหลังจาก การเพิ่มจำนวน 30–50+ ครั้ง และการผ่านเซลล์ซ้ำ ๆ ฉันเห็นบทความนี้ทำให้เห็นประเด็นที่ชัดเจนสี่ประการ: วงจรโปรโมเตอร์ที่สามารถเหนี่ยวนำได้ เป็นวงจรที่สร้างได้ง่ายที่สุดและเหมาะสำหรับการทดสอบจุดตรวจสอบเบื้องต้น แต่โดยปกติแล้วจะอ่าน ข้อมูลทีละหนึ่งอินพุต. วงจรควบคุมด้วยการตอบกลับ เหมาะสำหรับ การตรวจสอบในไบโอรีแอคเตอร์ เพราะสามารถปรับผลลัพธ์ตามการเปลี่ยนแปลงของสถานะเซลล์ได้ แม้ว่าจะเพิ่มภาระในชั้นควบคุม วงจรเกตลอจิก ลดการเกิดผลบวกเท็จโดยการรวมสัญญาณ แต่การเพิ่มเกตแต่ละตัวจะเพิ่มภาระในการออกแบบและความเสี่ยงในการลอยตัว ระบบรายงานหลายรายการ ให้ภาพรวมที่กว้างที่สุดของสถานะเซลล์...
-
ระบบใช้ครั้งเดียว vs ระบบสแตนเลส: รีวิวซัพพลายเออร์
หากฉันกำลังตรวจสอบซัพพลายเออร์กระบวนการชีวภาพสำหรับเนื้อสัตว์ที่เพาะเลี้ยง ฉันไม่ควรให้คะแนนระบบใช้ครั้งเดียวและระบบสแตนเลสในแบบเดียวกัน หนึ่งพึ่งพาฟิล์มถุง ข้อมูล E &L และการจัดหาวัสดุสิ้นเปลือง อีกหนึ่งขึ้นอยู่กับการตรวจสอบวัสดุ การออกแบบที่ถูกสุขลักษณะ การสนับสนุน CIP/SIP และการครอบคลุมอะไหล่ สำหรับวิศวกรกระบวนการชีวภาพ นักวิทยาศาสตร์เพาะเลี้ยงเซลล์ และทีมวิจัยและพัฒนาเนื้อสัตว์ที่เพาะเลี้ยง การตรวจสอบซัพพลายเออร์มักจะลงเอยที่ สี่สิ่ง: ความเหมาะสมทางเทคนิค ที่ปริมาตรการทำงาน บันทึกคุณภาพ และการควบคุมการเปลี่ยนแปลง ผลกระทบต่อสถานที่ เช่น สาธารณูปโภค การทำความสะอาด และระบบอัตโนมัติ การสนับสนุนระยะยาว สำหรับวัสดุสิ้นเปลือง บริการ และอะไหล่...
-
ระบบเพอร์ฟิวชัน: แบบใช้ครั้งเดียวเทียบกับแบบใช้ซ้ำ
หากคุณดำเนินการเพอร์ฟิวชั่นสำหรับเนื้อสัตว์ที่เพาะเลี้ยง การเลือกตั้งค่ามักจะขึ้นอยู่กับคำถามหนึ่งข้อ: คุณต้องการให้ภาระหลักอยู่ที่ไหน - ในเส้นทางการไหลที่ใช้แล้วทิ้งหรือในการทำความสะอาดและการตรวจสอบใหม่? ฉันเห็นการแบ่งแยกเช่นนี้: การใช้ครั้งเดียว มักจะเหมาะกับ R&D, งานนำร่อง, และการวิ่งระยะสั้น แก้วหรือสแตนเลสที่ใช้ซ้ำได้ มักจะเหมาะกับ แคมเปญที่เสถียรและการใช้โรงงานร่วมกัน ในทั้งสองกรณี, การกักเก็บเซลล์ ยังคงเป็นจุดกดดันหลัก, โดยเฉพาะอย่างยิ่งกับ ATF หรือ TFF การเลือกไม่ได้เกี่ยวกับภาชนะเท่านั้น; มันยังเปลี่ยน การจัดวางท่อ, การควบคุมการอุดตัน, ขั้นตอนการปลอดเชื้อ, และเวลาการหมุนเวียน หากการรักษาลูกค้าเป็นส่วนหนึ่งของรูปแบบวัฒนธรรม เช่น ระบบเตียงบรรจุ,...
-
LAL กับ rFC: การเปรียบเทียบวิธีทดสอบเอนโดท็อกซิน
หากคุณทดสอบเอนโดทอกซินในตัวอย่างเนื้อสัตว์ที่เพาะเลี้ยง วิธีที่เหมาะสมขึ้นอยู่กับเมทริกซ์ของตัวอย่างมากกว่าฉลากชุดทดสอบ ฉันจะสรุปได้ดังนี้: LAL ให้คุณมีขั้นตอนการทำงานที่คุ้นเคย, ในขณะที่ rFC สามารถลดผลบวกปลอมในสื่อที่มีเบต้า-กลูแคนสูงและสนับสนุนการจัดหาที่ปราศจากสัตว์. แต่ไม่ควรเลือกวิธีใดวิธีหนึ่งเพียงเพราะหลักการเท่านั้นสำหรับตัวอย่างสื่อ, น้ำซุปในเครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพ, และการเก็บเกี่ยว คำถามหลักคือ: การทดสอบใดที่ให้ข้อมูล EU/mL ที่สะอาดและสามารถกู้คืนได้ในเมทริกซ์จริงที่คุณใช้งาน? นี่คือสิ่งที่สำคัญที่สุดสำหรับคุณ: LAL ใช้ไลเซตจากปูเกือกม้าและอาจได้รับผลกระทบจาก การเกิดปฏิกิริยาข้ามของ Factor G rFC ใช้ Factor C ที่สร้างขึ้นใหม่และมักจะเหมาะสมกว่าเมื่อ เบต้า-กลูแคน มีอยู่ ทั้งสองวิธีอาจล้มเหลวในตัวอย่างที่ซับซ้อน ที่มี...
-
การตั้งค่าชุดไบโอรีแอกเตอร์สำหรับการรีเซลลูลาริไซเซชัน: แนวทางปฏิบัติที่ดีที่สุด
หากการหว่านเซลล์ไม่สม่ำเสมอตั้งแต่เริ่มต้น การไหลเวียนในภายหลังจะไม่สามารถแก้ไขได้ สำหรับวิศวกรกระบวนการชีวภาพและทีมวิจัยและพัฒนาการผลิตเนื้อสัตว์เพาะเลี้ยง & การตั้งค่าต้องทำงานสี่อย่างพร้อมกัน: จับคู่ห้องกับโครงสร้าง, รักษาวงจรให้ปิดและปลอดเชื้อ, จัดเตรียมการยึดก่อนการไหลที่สูงขึ้น, และตรวจสอบสัญญาณระดับโครงสร้าง เช่น TMP, ฟลักซ์, pH, และออกซิเจนละลายที่ทางเข้า–ทางออก ฉันจะสรุปบทความนี้ว่า: กำหนดเนื้อเยื่อและโครงสร้างก่อน จากนั้นสร้างไบโอรีแอคเตอร์รอบเป้าหมายนั้น. สำหรับโครงสร้างที่หนากว่า 1 ซม., จำเป็นต้องมีการไหลเวียนเพื่อควบคุมการขนส่งออกซิเจนและสารอาหาร ฉันจะแยกกระบวนการออกเป็นสองขั้นตอนที่ชัดเจน: การยึดแบบคงที่หรือการไหลต่ำมาก ก่อน จากนั้นเพิ่มการไหลที่บันทึกไว้สำหรับการเพาะเลี้ยง การเลือกเพียงครั้งเดียวนี้สามารถลดการล้างออกในช่วงต้นและทำให้การติดตามข้อบกพร่องง่ายขึ้นในภายหลัง หากคุณต้องการเวอร์ชันสั้น นี่คือ: เริ่มต้นด้วยเป้าหมาย, ไม่ใช่ฮาร์ดแวร์...
-
การเปรียบเทียบการให้อาหารแบบต่อเนื่องกับแบบเป็นชุด: วิธีการส่งสารอาหาร
หากคุณต้องการคำตอบสั้น ๆ: การป้อนแบบแบทช์นั้นง่ายต่อการดำเนินการ ในขณะที่การป้อนแบบเพอร์ฟิวชั่นให้การควบคุมสารอาหารและของเสียที่แน่นหนากว่าในความหนาแน่นของเซลล์สูง สำหรับวิศวกรกระบวนการชีวภาพและทีมวิจัยและพัฒนาของเนื้อสัตว์ที่เพาะเลี้ยง การเลือกมักจะลงเอยที่นี่: การป้อนแบบแบทช์หรือเฟดแบทช์ ตั้งค่าง่ายกว่า ติดตามได้ง่ายกว่าแบบล็อตต่อล็อต และมักจะเหมาะสมกว่าสำหรับการวิจัยและพัฒนาในระยะแรก& การป้อนแบบเพอร์ฟิวชั่น รักษาระดับสารตั้งต้นให้คงที่มากขึ้น กำจัดแลคเตท แอมโมเนีย และ CO₂ ที่ละลายระหว่างการดำเนินการ และรองรับความหนาแน่นของเซลล์ที่มีชีวิตได้สูงกว่ามาก การแลกเปลี่ยนมีความชัดเจน: ผลผลิตต่อปริมาตรเครื่องปฏิกรณ์มากขึ้นเมื่อเทียบกับภาระของระบบที่มากขึ้น. ในขนาดที่ใหญ่ขึ้น การป้อนแบบแบทช์มักถูกจำกัดด้วยการสะสมของผลพลอยได้และการถ่ายโอนก๊าซ ในขณะที่การป้อนแบบเพอร์ฟิวชั่นมักถูกจำกัดด้วย การใช้สื่อ ความน่าเชื่อถือของระบบการกักเก็บ และระบบอัตโนมัติ. หากฉันกำลังคัดกรองสื่อ ตรวจสอบพฤติกรรมของเซลล์ หรือดำเนินการแคมเปญพัฒนาระยะสั้น ฉันจะเลือกใช้แบบแบทช์หรือเฟดแบทช์...
-
การนำสารอาหารกลับมาใช้ใหม่จากผลพลอยได้ของเนื้อสัตว์เพาะเลี้ยง
หากคุณดำเนินการพัฒนากระบวนการผลิตเนื้อสัตว์ที่เพาะเลี้ยง การฟื้นฟูสารอาหารส่วนใหญ่เป็นคำถามเกี่ยวกับการเลือกสตรีม เป้าหมายความบริสุทธิ์ และการควบคุมการปล่อย ในแง่ที่ง่าย: สื่อที่ใช้แล้วมักจะยังคงมีกรดอะมิโน วิตามิน แร่ธาตุ และปัจจัยโปรตีนบางอย่างที่ยังไม่ได้ใช้; เศษชีวมวลมีโปรตีนและวัสดุภายในเซลล์; และแต่ละสตรีมต้องการเส้นทางการฟื้นฟูที่แตกต่างกันก่อนการนำกลับมาใช้ใหม่หรือการเบี่ยงเบน สำหรับ วิศวกรกระบวนการชีวภาพ นักวิทยาศาสตร์การเพาะเลี้ยงเซลล์ และ ทีมวิจัยและพัฒนาเนื้อสัตว์ที่เพาะเลี้ยง, บทความนี้สรุปได้ดังนี้: แยกคำศัพท์ออกก่อน: การฟื้นฟูสารอาหารไม่เหมือนกับการรีไซเคิลสื่อ การใช้ร่วมผลิต หรือการบำบัดน้ำเสีย เริ่มต้นด้วยสตรีมที่สำคัญที่สุด: สื่อการขยายตัวและการแยกแยะที่ใช้แล้ว เศษซากการเก็บเกี่ยว และเศษเซลล์ เลือกเส้นทางการฟื้นฟูที่เบาที่สุดที่ตรงตามข้อกำหนด: การชี้แจง, ขั้นตอนเมมเบรน, การตกตะกอน, โครมาโตกราฟี,...
-
การประมวลผลปลายน้ำ: รายการตรวจสอบการทำให้บริสุทธิ์ชีวมวล
หากชีวมวลที่เก็บเกี่ยวของคุณไม่ได้ถูกกำหนดไว้ รถไฟสายปลายน้ำของคุณก็หลุดออกจากรางแล้ว สำหรับทีมเนื้อสัตว์ที่เพาะเลี้ยง งานหลักนั้นง่าย: กู้คืน เซลล์ทั้งหมด, กลุ่มเซลล์, หรือชีวมวลที่มีโครงสร้าง ด้วยความเสียหายน้อย, ลดสื่อที่เหลือ, โปรตีน, DNA, และเศษซากให้ถึงขีดจำกัดระดับอาหาร และปล่อยเฉพาะวัสดุที่ยังคงอยู่ในสเปคจากการเก็บเกี่ยวจนถึงการถือครองสุดท้าย ฉันจะสรุปรายการตรวจสอบนี้ให้เหลือสี่ประตูผ่าน: ตั้งเป้าหมายผลิตภัณฑ์ก่อน: เซลล์ทั้งหมด, กลุ่มเซลล์, และชีวมวลที่มีโครงสร้างไม่ทนต่อการตั้งค่าการแยกหรือแรงเฉือนเดียวกัน เลือกขั้นตอนการทำให้ชัดเจนน้อยที่สุดที่ยังคงตอบสนองการผลิต: การหมุนเหวี่ยงย้อนกลับ, การกรองลึก, การกรองระดับไมโคร/TFF, และการหมุนเหวี่ยงความเร็วสูงแต่ละอย่างมีการแลกเปลี่ยนแรงเฉือน, พื้นที่, ภาระการทำความสะอาด, และความเหมาะสมของขนาด กำหนดจุดสิ้นสุดที่วัดได้ก่อนการดำเนินการ: ค่า pH,...
