दुनिया का पहला संवर्धित मांस B2B मार्केटप्लेस: घोषणा पढ़ें

संवर्धित मांस जैवप्रसंस्करण के लिए pH नियंत्रण रणनीतियाँ

pH Control Strategies for Cultivated Meat Bioprocessing

David Bell |

संवर्धित मांस उत्पादन के लिए सटीक pH स्तर बनाए रखना महत्वपूर्ण है। स्तनधारी कोशिकाएं एक संकीर्ण pH सीमा (7.1–7.4) में पनपती हैं, लेकिन चयापचय अम्लीकरण, CO₂ का निर्माण, और मिश्रण की चुनौतियाँ pH नियंत्रण को जटिल बनाती हैं, विशेष रूप से बड़े पैमाने के बायोरिएक्टरों में। प्रभावी रणनीतियों में शामिल हैं:

  • गैस स्पार्जिंग: अतिरिक्त CO₂ को हटाता है बिना ऑस्मोलैलिटी बढ़ाए या स्थानीयकृत pH स्पाइक्स का कारण बने।
  • उन्नत सेंसर: पोटेंशियोमेट्रिक सेंसर स्टेनलेस स्टील सिस्टम के लिए उच्च सटीकता प्रदान करते हैं, जबकि ऑप्टिकल सेंसर एकल-उपयोग बायोरिएक्टरों के साथ अच्छी तरह से काम करते हैं।
  • बफर अनुकूलन: HEPES जैसे बफर जोड़ने से स्थिरता में सुधार होता है लेकिन अतिरिक्त लैक्टेट उत्पादन से बचने के लिए सावधानीपूर्वक संतुलन की आवश्यकता होती है।
  • स्वचालित प्रणालियाँ: फीडबैक लूप्स का उपयोग करके वास्तविक समय में समायोजन सुनिश्चित करते हैं कि pH स्तर स्थिर रहें।

ये दृष्टिकोण लैक्टिक एसिड संचय और शियर तनाव जैसी चुनौतियों को दूर करने में मदद करते हैं, जिससे कोशिका स्वास्थ्य और उत्पाद की उपज में सुधार होता है।

बायोप्रोसेस में pH माप को समझना

pH प्रबंधन में प्रमुख चुनौतियाँ

यह खंड pH अस्थिरता में योगदान देने वाले मुख्य कारकों की गहराई से जांच करता है, जो पहले चर्चा की गई चुनौतियों पर आधारित है।

चयापचय अम्लीकरण और लैक्टिक एसिड संचय

लैक्टिक एसिड, संवर्धित मांस बायोप्रोसेसिंग में एक प्रमुख बाधा है। जब कोशिकाएं ग्लाइकोलाइसिस के माध्यम से ग्लूकोज का चयापचय करती हैं, तो वे 1:1 अनुपात में लैक्टेट और हाइड्रोजन आयन का उत्पादन करती हैं। यह प्रक्रिया एक महत्वपूर्ण अम्लीय भार उत्पन्न करती है, जिससे लैक्टेट माध्यम अम्लीकरण का मुख्य चालक बन जाता है [1].

मानक संस्कृति माध्यम की बफरिंग क्षमता - आमतौर पर प्रति pH इकाई 1.1 और 1.6 mM के बीच [1] - अक्सर तेजी से कोशिका वृद्धि की अवधि के दौरान अपर्याप्त होती है।जैसे-जैसे कोशिकाएं बढ़ती हैं, उनका चयापचय अपशिष्ट उत्पादन बढ़ता है, जिससे माध्यम की स्थिर pH बनाए रखने की क्षमता प्रभावित होती है। इस चरण के दौरान pH में तेज गिरावट को सीधे ग्लाइकोलिटिक लैक्टिक एसिड उत्पादन [1] से जोड़ा जा सकता है, जो माध्यम के pH को अस्थिर करने में लैक्टेट की महत्वपूर्ण भूमिका को रेखांकित करता है।

जटिलताएं यहीं नहीं रुकतीं। CO2 संचय एक और जटिलता की परत जोड़ता है।

CO2 संचय और pH बहाव

कोशिकीय श्वसन माध्यम में CO2 को पेश करता है, जहां यह घुलकर कार्बोनिक एसिड बनाता है। मुख्य मुद्दा घुले हुए CO2 का आंशिक दबाव (pCO2) है, जो यह प्रभावित करता है कि CO2 कोशिकाओं से बाहर निकल सकता है या नहीं। जब माध्यम में pCO2 स्तर बहुत अधिक बढ़ जाता है, तो CO2 कोशिकाओं के अंदर फंस जाता है, जिससे अंतःकोशिकीय pH में खतरनाक गिरावट होती है और अंततः कोशिका मृत्यु की ओर ले जाती है [2]

"यदि pCO2 बहुत अधिक है, तो CO2 कोशिकाओं को नहीं छोड़ सकता, इसलिए अंतःकोशिकीय pH गिर जाएगा और कोशिकाएं मर जाएंगी।" - Alicat Scientific [2]

यह समस्या बड़े पैमाने के बायोरिएक्टरों में अधिक स्पष्ट हो जाती है। इन प्रणालियों में सतह-क्षेत्र-से-आयतन अनुपात कम होता है, जो छोटे बर्तनों की तुलना में CO2 डिगैसिंग की दक्षता को कम करता है [3]। यहां तक कि नियमित संचालन, जैसे कि मीडिया को CO2 इनक्यूबेटर में स्थानांतरित करना, pH में उतार-चढ़ाव का कारण बन सकता है। उदाहरण के लिए, छोटे मीडिया वॉल्यूम लगभग तुरंत क्षारीय होना शुरू कर देते हैं, जिसमें 2-3 घंटे का समय स्थिरांक होता है [1].

रासायनिक चुनौतियों के साथ-साथ, भौतिक प्रक्रियाएं भी pH अस्थिरता में महत्वपूर्ण भूमिका निभाती हैं।

मिश्रण और शियर स्ट्रेस का pH स्थिरता पर प्रभाव

एक आधार जोड़कर pH को समायोजित करना अपने स्वयं के जोखिम लाता है।जब सोडियम बाइकार्बोनेट या इसी तरह के बेस को बायोरिएक्टर में पंप किया जाता है, तो खराब मिक्सिंग से उच्च pH वाले स्थानीय क्षेत्र बन सकते हैं जो पास के कोशिकाओं को नुकसान पहुंचाते हैं [2] [3]। दूसरी ओर, बेस को समान रूप से वितरित करने के लिए आवश्यक जोरदार हलचल से शियर तनाव और फोम का निर्माण हो सकता है, जो नाजुक स्तनधारी कोशिकाओं के लिए हानिकारक होते हैं [2] [3].

नियंत्रित प्रयोगों में, pH को स्थिर करने के लिए बेस जोड़ने से अक्सर कोशिका की जीवन क्षमता कम हो जाती है क्योंकि ऑस्मोलैलिटी बढ़ जाती है [3]। यह एक कठिन संतुलन कार्य बनाता है: अपर्याप्त मिक्सिंग से pH हॉटस्पॉट बनते हैं, जबकि अत्यधिक मिक्सिंग हॉटस्पॉट को रोकती है लेकिन यांत्रिक तनाव बढ़ाती है। समस्या स्केल-अप के दौरान और भी चुनौतीपूर्ण हो जाती है, जहां लंबे मिक्सिंग समय प्रभावी pH नियंत्रण बनाए रखना कठिन बना देते हैं बिना कोशिका स्वास्थ्य को प्रभावित किए।

पीएच निगरानी और नियंत्रण के लिए प्रौद्योगिकियाँ

स्तनधारी कोशिका संस्कृतियों के लिए 7.1–7.4 की संकीर्ण सीमा के भीतर पीएच बनाए रखना महत्वपूर्ण है, जिसके लिए सटीक और विश्वसनीय निगरानी उपकरणों की आवश्यकता होती है[2]पोटेंशियोमेट्रिक सेंसर, जो मुक्त हाइड्रोजन आयनों को मापने के लिए इलेक्ट्रोड के रूप में कार्य करते हैं, बायोरिएक्टर में निरंतर पीएच निगरानी के लिए स्वर्ण मानक हैं[1]। ये सेंसर वास्तविक समय डेटा प्रदान करते हैं, जिससे स्वचालित प्रणालियों को आवश्यक पीएच स्तर बनाए रखने के लिए तुरंत समायोजन करने में सक्षम बनाते हैं। उनकी उच्च सटीकता उन्हें बड़े पैमाने पर संचालन के लिए आवश्यक बनाती है। इनके साथ, ऑप्टिकल संकेतक पीएच मापने का एक और प्रभावी तरीका प्रदान करते हैं।

ऑप्टिकल संकेतक मात्रात्मक पीएच माप प्रदान करने के लिए स्पेक्ट्रोस्कोपिक विश्लेषण पर निर्भर करते हैं।जबकि फिनोल रेड को अक्सर एक दृश्य संकेतक के रूप में उपयोग किया जाता है, अधिक सटीक रीडिंग दो विशिष्ट तरंग दैर्ध्य - 560 nm और 430 nm पर अवशोषण के रेशियोमेट्रिक विश्लेषण के माध्यम से प्राप्त की जाती हैं [1] । यह विधि मीडिया की मात्रा या डाई की सांद्रता जैसे कारकों की भरपाई करती है, जिससे लगातार और सटीक परिणाम सुनिश्चित होते हैं।

"मुक्त H+ आयनों की सांद्रता का पूर्वानुमान सहज नहीं है, लेकिन सौभाग्य से इसे मापना सरल है (e.g. इलेक्ट्रोड या संकेतक डाई के साथ)।" - जोहाना मिचल एट अल., ऑक्सफोर्ड विश्वविद्यालय [1]

आधुनिक pH नियंत्रण प्रणाली निगरानी से आगे बढ़कर इन मापों को स्वचालित फीडबैक लूप्स में एकीकृत करती हैं जो गतिशील रूप से pH स्तरों को नियंत्रित करती हैं।

स्वचालित फीडबैक सिस्टम सेंसर डेटा का उपयोग करके वास्तविक समय में समायोजन करते हैं, जिससे मैनुअल हस्तक्षेप की आवश्यकता समाप्त हो जाती है। ये सिस्टम pH को समायोजित करने के लिए एक आधार जोड़कर या गैस स्पार्जिंग तकनीकों का उपयोग करके समायोजन कर सकते हैं [2]।बड़े पैमाने के बायोरिएक्टरों के लिए, गैस स्पार्जिंग विशेष रूप से प्रभावी है। मास फ्लो कंट्रोलर्स का उपयोग करके, CO2 स्तरों को जल्दी और समान रूप से समायोजित किया जा सकता है, जिससे समान pH विनियमन सुनिश्चित होता है [2]। इसके विपरीत, बेस पंपिंग, जबकि छोटे सिस्टम के लिए प्रभावी है, स्थानीय pH असंतुलन पैदा कर सकता है और ऑस्मोलैलिटी बढ़ा सकता है, जिससे यह बड़े वेसल्स के लिए कम व्यावहारिक हो जाता है [2]। हालांकि, गैस स्पार्जिंग के लिए स्पार्जर्स के डिज़ाइन पर सावधानीपूर्वक ध्यान देने की आवश्यकता होती है ताकि शियर स्ट्रेस से बचा जा सके जो कोशिकाओं को नुकसान पहुंचा सकता है [2]। संवर्धित मांस उत्पादन में लगे लोगों के लिए, उन्नत गैस नियंत्रण प्रणालियों में निवेश करना बेहतर कोशिका स्वास्थ्य और उच्च उपज की ओर ले जा सकता है, जिससे यह एक सार्थक व्यय बन जाता है।

वृहद स्तर पर pH प्रबंधन के लिए रणनीतियाँ

Potentiometric vs Optical pH Sensors for Cultivated Meat Bioreactors

संवर्धित मांस बायोरिएक्टर के लिए पोटेंशियोमेट्रिक बनाम ऑप्टिकल pH सेंसर

पोटेंशियोमेट्रिक बनाम ऑप्टिकल सेंसर: एक तुलना

संवर्धित मांस उत्पादन के बढ़ने के साथ सही सेंसर तकनीक का चयन करना अत्यधिक महत्वपूर्ण हो जाता है। पोटेंशियोमेट्रिक सेंसर स्टेनलेस स्टील बायोरिएक्टर के लिए उनकी सटीकता और त्वरित प्रतिक्रिया के कारण पसंदीदा विकल्प हैं। हालांकि, इन्हें नियमित अंशांकन की आवश्यकता और लंबे समय तक चलने वाली प्रक्रियाओं के दौरान बहाव के प्रति संवेदनशीलता जैसी चुनौतियों का सामना करना पड़ता है। जैकब क्रो, & टेक सपोर्ट मैनेजर Hamilton कंपनी में, बताते हैं:

"समय के साथ, pH माप में बहाव हो सकता है, जो प्रक्रिया की स्थिरता और प्रदर्शन को प्रभावित करेगा।

यह महत्वपूर्ण है कि pH बहाव की निगरानी और शमन किया जाए ताकि चयापचय और समग्र प्रक्रिया पर हानिकारक प्रभावों को रोका जा सके।

[8].

दूसरी ओर, ऑप्टिकल सेंसर एक व्यावहारिक विकल्प के रूप में उभरते हैं, विशेष रूप से एकल-उपयोग बायोरिएक्टर सिस्टम के लिए। ये सेंसर डिस्पोजेबल बैग में पहले से स्थापित किए जा सकते हैं, जिससे संदूषण के जोखिम कम हो जाते हैं और चक्रों के बीच नसबंदी की आवश्यकता समाप्त हो जाती है।

[7].

माइक्रोफ्लुइडिक सिस्टम में, ऑप्टिकल सेंसर ने उत्कृष्ट परिणाम दिखाए हैं, 262,500 कोशिकाओं/मिलीलीटर की घनत्व पर 95.45% कोशिका जीवंतता प्राप्त की है।

[9].

विशेषता पोटेंशियोमेट्रिक सेंसर ऑप्टिकल सेंसर
सटीकता उच्च, लेकिन बहाव के प्रति संवेदनशील उच्च; वास्तविक समय निगरानी के लिए आदर्श
रखरखाव बार-बार अंशांकन की आवश्यकता न्यूनतम; अक्सर एकल-उपयोग
विस्तार क्षमता स्टेनलेस स्टील सेटअप के लिए मानक एकल-उपयोग और माइक्रोफ्लुइडिक्स के लिए उत्कृष्ट
प्रतिक्रिया समय तेज़, इलेक्ट्रोड स्थिरता द्वारा सीमित तत्काल वास्तविक समय प्रतिक्रिया
लागत प्रभाव उच्च श्रम और रखरखाव लागत निम्न श्रम; डिस्पोजेबल में एकीकृत

सेंसर का चयन मुख्य रूप से रिएक्टर के प्रकार पर निर्भर करता है।स्टेनलेस स्टील बायोरिएक्टर्स पोटेंशियोमेट्रिक सेंसर से लाभान्वित हो सकते हैं जिनमें ड्रिफ्ट को प्रबंधित करने के उपाय होते हैं, जबकि सिंगल-यूज़ प्लेटफॉर्म एकीकृत ऑप्टिकल सेंसर की आसानी का लाभ उठा सकते हैं [7] [8]। ये निर्णय सीधे प्रभावित करते हैं कि माध्यम अनुकूलन के दौरान pH स्थिरता कैसे बनाए रखी जाती है।

माध्यम अनुकूलन और बफर सुधार

एक बार जब उपयुक्त सेंसर स्थापित हो जाते हैं, तो स्केल-अप के दौरान pH नियंत्रण बनाए रखने के लिए संस्कृति माध्यम की बफरिंग प्रणाली को स्थिर करना आवश्यक हो जाता है। स्तनधारी कोशिकाएं CO₂/HCO₃⁻ बफर प्रणाली (pKa 6.15 पर 37°C) पर निर्भर करती हैं, लेकिन इसकी बफरिंग क्षमता अक्सर अपर्याप्त होती है। उदाहरण के लिए, मानक DMEM 10% FBS के साथ आमतौर पर केवल 1.1 से 1.6 mM की बफरिंग प्रदान करता है [1]

इसका समाधान करने के लिए, HEPES (pKa 7.3 at 37°C) बिना समस्याग्रस्त ऑस्मोलैलिटी शिफ्ट के बफरिंग को महत्वपूर्ण रूप से मजबूत कर सकता है [1]। अनुशंसित विधि में पहले माध्यम को लक्षित pH तक टाइट्रेट करना शामिल है, फिर NaHCO₃ को इनक्यूबेटर के pCO₂ के साथ संरेखित एकाग्रता पर जोड़ना। यह दृष्टिकोण ताजा मीडिया को CO₂ के संपर्क में आने पर प्रारंभिक pH बहाव को कम करता है, एक प्रक्रिया जो NVBs के साथ दो घंटे तक ले सकती है [1].

हालांकि, मजबूत बफरिंग सिस्टम बढ़ी हुई ग्लाइकोलाइसिस को ट्रिगर कर सकते हैं, जिससे उच्च लैक्टेट उत्पादन हो सकता है। कुछ सेल लाइनों में, 90% तक ग्लूकोज सीधे लैक्टेट में परिवर्तित हो जाता है [1], और बेहतर बफरिंग कभी-कभी इस प्रभाव को बढ़ा सकती है, जिसके परिणामस्वरूप अधिक लैक्टिक एसिड संचय होता है [10].

स्पार्जिंग और एगिटेशन तकनीक

गैस स्पार्जिंग बड़े पैमाने पर खेती किए गए मांस उत्पादन में pH को प्रबंधित करने का एक व्यावहारिक तरीका प्रदान करता है।Alicat Scientific नोट्स:

"स्पार्जर्स से गैस बुलबुले बेस की तुलना में अधिक तेजी से और कम हलचल के साथ समान रूप से मिलाए और वितरित किए जा सकते हैं" [2].

गैस बुलबुलों को समान रूप से वितरित करके, स्पार्जिंग रासायनिक बेस जोड़ने की तुलना में अधिक सुसंगत दृष्टिकोण प्रदान करता है। उदाहरण के लिए, 2018 के एक अध्ययन ने दिखाया कि हेडस्पेस एरेशन बढ़ाते समय स्थिर स्पार्ज दरों को बनाए रखने से 30 L से 250 L तक के स्केल-अप के दौरान टाइटर्स स्थिर रहे [2].

मैक्रो स्पार्जर्स, जो 1–4 मिमी व्यास के बुलबुले उत्पन्न करते हैं, विशेष रूप से संस्कृति से अतिरिक्त CO₂ को हटाने में प्रभावी होते हैं। यह pH को स्वाभाविक रूप से बढ़ाता है, रासायनिक बेस की आवश्यकता से बचाता है जो ऑस्मोलैलिटी को बढ़ा सकता है [2] [5]। एक नया "गैस-केवल" pH नियंत्रण रणनीति स्वचालित एयर स्पार्जिंग फीडबैक लूप्स का उपयोग करती है।जब pH गिरता है, तो अधिक CO₂ हटाने के लिए वायु प्रवाह बढ़ जाता है। इस विधि को ambr®250 बायोरिएक्टर से 200 L पोतों तक सफलतापूर्वक स्केल किया गया है, जिससे फेड-बैच संस्कृतियों के दौरान सटीक pH स्तर बनाए रखा जाता है [6] .

स्केल-अप के दौरान न्यूनतम कतरनी तनाव के साथ कुशल गैस स्थानांतरण को संतुलित करना एक महत्वपूर्ण चुनौती बनी रहती है। एयरलिफ्ट बायोरिएक्टर, जो गैस-चालित परिसंचरण का उपयोग करते हैं, कम कतरनी तनाव के साथ एक कोमल मिश्रण विकल्प प्रदान करते हैं। कम्प्यूटेशनल फ्लुइड डायनेमिक्स (CFD) सिमुलेशन भी इम्पेलर ब्लेड के पास उच्च-कतरनी क्षेत्रों की पहचान करने में मदद कर सकते हैं, जिससे स्केल-अप से पहले बायोरिएक्टर डिज़ाइनों को अनुकूलित किया जा सकता है [4]। इन दृष्टिकोणों को Cellbase से उन्नत उपकरणों के साथ मिलाकर स्केल-अप के दौरान pH प्रबंधन को सुव्यवस्थित किया जा सकता है।

pH नियंत्रण उपकरण की सोर्सिंग Cellbase के माध्यम से

Cellbase

प्रोक्योरमेंट के लिए Cellbase क्यों चुनें?

संवर्धित मांस बायोप्रोसेसिंग में सटीक pH नियंत्रण आवश्यक है, जिससे सही उपकरण का सोर्सिंग करना महत्वपूर्ण हो जाता है। सामान्य लैब सप्लाई प्लेटफॉर्म अक्सर इस क्षेत्र में आवश्यक सख्त pH रेंज के लिए विशेष ज्ञान की कमी रखते हैं। Cellbase इस अंतर को पाटता है, पेशेवरों को सत्यापित आपूर्तिकर्ताओं से जोड़कर जो इन मांगलिक मानकों को पूरा करते हैं [2] .

Cellbase का उपयोग करके, प्रोक्योरमेंट अधिक सरल हो जाता है। यह प्लेटफॉर्म पारदर्शी मूल्य निर्धारण और उद्योग-विशिष्ट विशेषज्ञता प्रदान करता है, pH नियंत्रण प्रौद्योगिकियों के लिए एक क्यूरेटेड मार्केटप्लेस बनाता है। विभिन्न चैनलों में कई आपूर्तिकर्ताओं के साथ जूझने के बजाय, R&D टीमें और उत्पादन प्रबंधक एक ही स्थान पर अपनी सभी आवश्यकताएं पा सकते हैं।यह न केवल खरीद की परेशानी को कम करता है बल्कि इसके सत्यापित लिस्टिंग के साथ तकनीकी जोखिमों को भी कम करता है।

pH नियंत्रण प्रौद्योगिकियों को खोजें Cellbase

Cellbase पोटेंशियोमेट्रिक सेंसर, ऑप्टिकल इंडिकेटर्स, और स्वचालित फीडबैक सिस्टम सहित pH प्रबंधन समाधान की एक विस्तृत श्रृंखला प्रदान करता है। ये स्टेनलेस स्टील और सिंगल-यूज़ बायोरिएक्टर दोनों के साथ संगत हैं, जो विविध परिचालन आवश्यकताओं को पूरा करते हैं।

विस्तार के लिए, प्लेटफ़ॉर्म मास फ्लो कंट्रोलर्स और विशेष स्पार्जर्स तक पहुंच प्रदान करता है, जो गैस-आधारित pH प्रबंधन के लिए महत्वपूर्ण हैं। जैसा कि Alicat Scientific ने उजागर किया है:

"उत्पाद टाइटर्स को बढ़ाने के लिए अपस्ट्रीम बायोप्रोसेसिंग में pH को स्वस्थ जैविक स्तरों पर रखना संभवतः सबसे शक्तिशाली उपकरण है" [2].

इसके अतिरिक्त, Cellbase उन्नत इंटेलिजेंट सेंसर मैनेजमेंट (ISM) तकनीक तक पहुंच प्रदान करता है।यह प्रणाली सेंसर जीवन की निगरानी करती है, जिससे विस्तारित बैच प्रक्रियाओं के दौरान पूर्वानुमानित रखरखाव सक्षम होता है [11].

खरीद विशेषज्ञ CO₂ स्ट्रिपिंग के लिए उपकरण भी स्रोत कर सकते हैं, जिसमें ऑटोक्लेव योग्य CO₂ सेंसर और सिंगल-यूज़ pH प्रोब शामिल हैं। ये उपकरण सटीक pH नियंत्रण बनाए रखने के लिए स्केलेबल रणनीतियों का समर्थन करते हैं, जिससे बड़े पैमाने पर उत्पादन में उन्नत pH प्रबंधन को एकीकृत करना आसान हो जाता है [11]। लक्षित समाधान प्रदान करके, Cellbase उत्पादन पाइपलाइन में उन्नत pH नियंत्रण प्रौद्योगिकियों को अपनाने को सरल बनाता है।

निष्कर्ष: संवर्धित मांस जैवप्रसंस्करण में pH नियंत्रण के लिए सर्वोत्तम प्रथाएँ

संवर्धित मांस उत्पादन में स्तनधारी कोशिकाओं के जीवित रहने के लिए pH सीमा 7.1 से 7.4 बनाए रखना महत्वपूर्ण है [2] । इस सीमा के भीतर pH बनाए रखना अपस्ट्रीम जैवप्रसंस्करण के दौरान उत्पाद उपज में सुधार करने में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है।

pH नियंत्रण की चुनौतियों का समाधान करने के लिए, कई प्रभावी प्रथाएं उभरी हैं। एक प्रमुख विधि है स्केल-अप के दौरान बेस जोड़ने के बजाय गैस स्पार्जिंग का उपयोग करना। गैस स्पार्जिंग अतिरिक्त CO₂ को प्रभावी ढंग से हटाता है, इसे न्यूनतम हलचल के साथ समान रूप से वितरित करके, जो pH असंगतियों और ऑस्मोलैलिटी उतार-चढ़ाव जैसी समस्याओं से बचने में मदद करता है [2]आर्योजेन फार्मेड द्वारा 2021 के एक अध्ययन ने 250-लीटर स्केल पर इस विधि की सफलता का प्रदर्शन किया, अंतिम उत्पाद की उपज में 51% की वृद्धि प्राप्त की [3]

एक अन्य महत्वपूर्ण प्रथा है प्रत्यक्ष pH निगरानी , जो pCO₂ मापों पर निर्भर रहने की तुलना में संस्कृति स्वास्थ्य की अधिक व्यापक समझ प्रदान करती है।यह विशेष रूप से महत्वपूर्ण है क्योंकि घुले हुए CO₂ स्तर लैक्टिक एसिड के निर्माण का हिसाब नहीं रखते हैं, जो कुछ सेल लाइनों में ग्लूकोज मेटाबोलिज्म का 90% तक हो सकता है [1]। जब मेटाबोलिक गतिविधि चरम पर होती है, तो घातीय वृद्धि चरण के दौरान pH की निगरानी सीधे और भी अधिक महत्वपूर्ण हो जाती है।

गैर-वाष्पशील बफर्स जैसे HEPES के लिए, बफर संतुलन पर विचार करना आवश्यक है। HEPES बफर्स को स्थिर होने में दो घंटे तक लग सकते हैं और इन्हें बाइकार्बोनेट और CO₂ के साथ सावधानीपूर्वक टाइट्रेट किया जाना चाहिए [1]। हालांकि, बफरिंग क्षमता बढ़ाने से अनजाने में लैक्टेट उत्पादन बढ़ सकता है, जो इच्छित स्थिरीकरण प्रभाव का प्रतिकार कर सकता है [1]। सेंसर-आधारित निगरानी और गैस स्पार्जिंग तकनीकों के साथ मिलकर, ये बफर विचार स्थिर और इष्टतम प्रक्रिया स्थितियों को बनाए रखने में मदद करते हैं।

सामान्य प्रश्न

संवर्धित मांस उत्पादन में पीएच नियंत्रण का समर्थन गैस स्पार्जिंग कैसे करता है?

गैस स्पार्जिंग संवर्धित मांस के उत्पादन के दौरान पीएच स्तर को संतुलित रखने में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। जब कोशिकाएं बढ़ती हैं, तो वे श्वसन के उप-उत्पाद के रूप में कार्बन डाइऑक्साइड (CO₂) छोड़ती हैं। यह CO₂ संस्कृति माध्यम के पीएच को कम कर सकता है, जो कोशिका स्वास्थ्य को नुकसान पहुंचा सकता है। बायोरिएक्टर में वायु, ऑक्सीजन, या निष्क्रिय गैसों जैसे गैसों को पेश करके, स्पार्जिंग अतिरिक्त CO₂ को हटाने में मदद करता है। यह माध्यम को अत्यधिक अम्लीय होने से रोकता है और पीएच को स्थिर रखता है।

संस्कृति माध्यम को लगभग 7.1 से 7.4 के आदर्श पीएच सीमा के भीतर बनाए रखना स्वस्थ कोशिका वृद्धि और उत्पादकता के लिए महत्वपूर्ण है। बफरिंग सिस्टम और पीएच सेंसर का उपयोग करके वास्तविक समय की निगरानी के साथ जोड़े जाने पर, गैस स्पार्जिंग न केवल प्रक्रिया की दक्षता में सुधार करता है बल्कि कोशिका की जीवन शक्ति को भी बढ़ाता है। यह संवर्धित मांस जैवप्रसंस्करण की सफलता सुनिश्चित करने में एक महत्वपूर्ण घटक है।

संवर्धित मांस उत्पादन में pH निगरानी के लिए पोटेंशियोमेट्रिक सेंसर ऑप्टिकल सेंसर की तुलना में बेहतर विकल्प क्यों हैं?

संवर्धित मांस उत्पादन में पोटेंशियोमेट्रिक सेंसर एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं क्योंकि वे वास्तविक समय pH माप उच्च सटीकता के साथ प्रदान करने में सक्षम होते हैं। उचित pH स्तर बनाए रखना कोशिका वृद्धि के लिए सही वातावरण बनाने के लिए आवश्यक है, और ये सेंसर उस डेटा को प्रदान करने में उत्कृष्ट होते हैं जो इसे प्राप्त करने के लिए आवश्यक होता है। इसके अलावा, वे अपेक्षाकृत सस्ते होते हैं और बड़े पैमाने पर बायोरिएक्टर में आसानी से एकीकृत हो जाते हैं, जिससे वे औद्योगिक सेटिंग्स में निरंतर निगरानी के लिए आदर्श बन जाते हैं।

इसके अलावा, ये सेंसर जटिल संस्कृति मीडिया की चुनौतियों को संभालने के लिए बनाए गए हैं, जो मांगलिक परिस्थितियों में भी विश्वसनीय प्रदर्शन प्रदान करते हैं। हालांकि, उनकी सटीकता बनाए रखने के लिए उन्हें समय-समय पर अंशांकन की आवश्यकता होती है।सटीकता, विश्वसनीयता, और लागत प्रभावशीलता के मिश्रण के साथ, पोटेंशियोमेट्रिक सेंसर संवर्धित मांस बायोप्रोसेसिंग में प्रभावी pH नियंत्रण के लिए एक पसंदीदा विकल्प बन गए हैं।

लैक्टिक एसिड का निर्माण स्थिर pH स्तर बनाए रखना क्यों कठिन बना देता है?

लैक्टिक एसिड का निर्माण संस्कृति वातावरण की अम्लता को बढ़ाकर pH नियंत्रण को जटिल बनाता है, जिससे pH गिर जाता है। यह कोशिका की जीवन क्षमता और उत्पादकता को नुकसान पहुंचा सकता है, क्योंकि अधिकांश कोशिकाओं को बढ़ने और सही ढंग से कार्य करने के लिए एक सावधानीपूर्वक नियंत्रित pH सीमा की आवश्यकता होती है।

लैक्टिक एसिड स्तरों का प्रबंधन संवर्धित मांस बायोप्रोसेसिंग में स्वस्थ कोशिका वृद्धि का समर्थन करने और उत्पाद की गुणवत्ता बनाए रखने के लिए महत्वपूर्ण है। वास्तविक समय pH निगरानी, pH बफर्स का उपयोग, या खिला प्रोटोकॉल को समायोजित करना जैसे दृष्टिकोण वातावरण को स्थिर करने और हानिकारक pH उतार-चढ़ाव से बचने में मदद कर सकते हैं।

संबंधित ब्लॉग पोस्ट

Author David Bell

About the Author

David Bell is the founder of Cultigen Group (parent of Cellbase) and contributing author on all the latest news. With over 25 years in business, founding & exiting several technology startups, he started Cultigen Group in anticipation of the coming regulatory approvals needed for this industry to blossom.

David has been a vegan since 2012 and so finds the space fascinating and fitting to be involved in... "It's exciting to envisage a future in which anyone can eat meat, whilst maintaining the morals around animal cruelty which first shifted my focus all those years ago"