バイオリアクターにおける培地無菌性のベストプラクティス
バイオリアクターの無菌状態を維持することは、培養肉の生産において非常に重要です。汚染はバッチ全体を台無しにし、資源を浪費し、スケジュールを乱す可能性があります。この記事では、システム設計からリアルタイムモニタリングおよび汚染対応まで、汚染を防ぐための実践的な手順を概説します。主なポイントは以下の通りです: 汚染の原因: 原材料、機器設計の欠陥、人為的ミス、空気中の粒子。 予防戦略: 無菌フィルター、ガンマ線照射された使い捨て部品、クローズドシステムの使用。 滅菌方法: 多用途バイオリアクターには現場蒸気滅菌(SIP)、使い捨て部品にはガンマ線照射。 モニタリングツール: 酸素とpHのインラインセンサー、アットライン光学密度テスト、微生物サンプリング。 対応プロトコル: 迅速なテスト、根本原因分析、ダウンタイムを最小限に抑えるための是正措置。 英国のチームがオペレーションを拡大する際、Cellbaseのようなプラットフォームは、無菌準備済みのコンポーネントの調達を簡素化し、厳しい無菌基準への準拠を確保します。強固な無菌対策への投資は、コストを削減し、一貫した生産品質を保証します。 バイオリアクターの無菌性のための5段階の汚染防止フレームワーク 汚染の主な原因 原材料と水 原材料はバイオリアクター内の汚染リスクにおいて大きな役割を果たします。成長培地の成分が適切に滅菌されていない場合、システムに微生物を導入する可能性があります。水システムもまた弱点です。バイオフィルムが水分配面に形成されると特に厄介で、ろ過に抵抗し、継続的に細菌を放出し、汚染が重大な問題になるまで気づかれないことがよくあります。[5]。汚染の影響は深刻で、収量を50〜100%削減し、細胞の成長を停止させ、培地、成長因子、労働に数千ポンドを浪費する可能性があります[3][5]。これらのリスクを軽減するために、0.45µmフィルターを使用した水の予備ろ過と、ガンマ線照射された使い捨てコンポーネントを選択することが効果的な対策です[3][5]。これに加えて、同様の問題を回避するためには、よく設計された機器が不可欠です。 機器とシステムの設計 バイオリアクターハードウェアの設計とメンテナンスは、汚染を防ぐ上で重要です。シール、ガスケット、バルブ、チューブ接合部などのコンポーネントは、残留物を閉じ込めて清掃が困難な場合、微生物の成長の温床になる可能性があります[3][6]。使い捨てシステムも免れません。セットアップ中の穴や不適切な接続により、コンポーネントが事前に滅菌されていても、汚染物質が侵入する可能性があります[3]. 多用途バイオリアクターはさらに大きな課題に直面しています。滅菌プロセスはしばしば不十分で、基本的な真空または重力滅菌サイクルではすべての空気を除去できず、システム全体で必要な121°Cに達することができません。これにより、微生物が生存できる「デッドレッグ」や影のある領域が残ります。バイオインジケーターテストでは、事前真空パルスがないと、温度センサーがそう示していても、滅菌が不完全であることが示されています[2][6][8]。バイオリアクターの内外をつなぐキャビティを持つコネクタは特に問題であり、汚染の直接的な経路を作り出すため、避けるべきです[4]。ハードウェア以外にも、人間の行動や環境条件が無菌状態の維持において重要な役割を果たします。 人間および環境要因 人為的ミスは汚染の主な原因です。不適切なガウンの着用、手指衛生の不備、またはバイオセーフティプロトコルの省略は、無菌環境に微生物を持ち込む可能性があります[3][5]。例えば、ケーススタディでは、無菌チューブを使用せずにプローブを不適切に挿入したことが、20–30%の汚染率を引き起こしたことが強調されています。同様に、非層流エリアでの手袋をしていない取り扱いが、培地内の細菌の過剰増殖を引き起こし、わずか24時間で培養肉の試験を完全に頓挫させました[3]。 環境条件はこれらのリスクをさらに悪化させます。微生物は空気中の粒子に乗って、HEPAフィルターの不十分なフィルタリングやドアの開閉時に侵入し、露出した培地や機器に付着することがあります。クリーンルームがISO 7基準またはそれ以上を満たしていても、一時的なイベントにより汚染率が100回の操作のうち1回に急上昇することがあります[3][5]。ガス供給もまた、0.45µmフィルターを必要とし、非滅菌ガスが密閉されたシステムに汚染物質を持ち込むのを防ぎます[3]。 これらの問題に対抗する最も実用的な方法の一つは、徹底した人材トレーニングです。業界データによると、効果的なトレーニングは人為的なエラーを80%削減でき、汚染管理において非常に費用対効果の高い戦略となります[3]。 無菌バイオリアクターシステムの設計と検証 衛生的なバイオリアクターデザインの原則 よく考えられた設計は、バイオリアクターシステムにおける汚染リスクを最小限に抑える鍵です。電解研磨されたステンレス鋼を使用すること(表面粗さRa < 0。4 µm)...





