세포주 인증은 연구 및 생산에 사용되는 세포주의 정체성과 순도를 보장하며, 특히 배양육에서 중요합니다. 이 과정은 오염, 잘못된 식별 및 유전적 변이를 방지하여 잘못된 결과, 자원 낭비 또는 안전 위험으로 이어질 수 있습니다. 알아야 할 사항은 다음과 같습니다:
- 주요 방법: STR 프로파일링(인간 세포용), SNP 프로파일링(동물 세포용) 및 마이코플라스마 테스트는 널리 사용되는 기술입니다.
- 테스트 시기: 새로운 세포주는 수령 즉시, 장기간 배양 기간 동안, 주요 이정표 이전 또는 비정상적인 행동이 관찰될 경우 인증해야 합니다.
- 규제 기준: ANSI/ATCC 및 ICLAC 지침을 따르며, 80% 유전자형 일치를 보장하고 3-6개월마다 정기적으로 테스트를 수행해야 합니다.
- 문서화: 규제 요구 사항을 충족하기 위해 세포주 출처, 배양 이력 및 테스트 결과에 대한 자세한 기록을 유지해야 합니다.
-
소싱: ATCC와 같은 검증된 공급업체 및
Cellbase 와 같은 플랫폼을 사용하여 인증된 자재에 접근하고 규정 준수를 보장하십시오.
정기적인 테스트와 적절한 문서화는 신뢰성을 유지하고 규제 요구 사항을 충족하며 배양육 생산에서 비용이 많이 드는 실수를 피하는 데 필수적입니다.
세포주 인증을 위한 주요 방법
단기 반복 서열(STR) 프로파일링
STR 프로파일링은 인간 세포주를 검증하는 데 가장 많이 사용되는 방법입니다. 반복된 서열을 가진 특정 DNA 영역을 분석하여 이 기술은 참조 데이터베이스와 비교할 수 있는 고유한 유전적 지문을 생성합니다. 인증을 위해서는 일반적으로 80% 이상의 일치가 필요합니다. STR 프로파일링 비용은 샘플당 £100에서 £300 사이이며, 결과는 보통 1-2주 이내에 제공됩니다. [2].그러나 사용되는 데이터베이스와 마커가 인간 세포에 맞춰져 있기 때문에, 이 방법은 비인간 세포주에 대해서는 그리 신뢰할 수 없을 수 있습니다. 그런 경우에는 SNP 프로파일링과 같은 다른 기술이 더 적합한 경우가 많습니다.
단일 뉴클레오타이드 다형성(SNP) 프로파일링
동물 유래 세포주가 일반적인 배양육 산업에서 SNP 프로파일링은 정밀한 대안을 제공합니다. 이 방법은 게놈 전반에 걸쳐 단일 뉴클레오타이드 차이를 조사하여, 밀접하게 관련된 종이나 균주를 구별할 수 있는 매우 상세한 식별을 가능하게 합니다. SNP 프로파일링은 일반적으로 샘플당 £200에서 £500 사이의 비용이 더 들고, STR 프로파일링에 비해 처리 시간이 약간 더 걸릴 수 있지만, 그 정확성 덕분에 비인간 세포주 인증에 이상적입니다.[2].
마이코플라스마 및 종 확인 테스트
배양육 생산에서 세포주 순도를 유지하는 것은 매우 중요합니다.마이코플라스마 오염은 시각적 검사로는 종종 감지할 수 없지만, 세포 행동에 심각한 영향을 미치고 연구 결과를 저해할 수 있습니다. PCR 기반 또는 효소 테스트 방법은 며칠 내에 마이코플라스마를 감지할 수 있으며, 샘플당 비용은 £50에서 £150 사이입니다. 세포 배양의 신뢰성을 보장하기 위해 정기적인 마이코플라스마 검사가 필수적입니다.[2].
종 확인도 매우 중요하며, 특히 여러 동물 세포주를 다룰 때 더욱 그렇습니다. 이는 종 내에서 보존되지만 종 간에는 충분히 변이가 있어 정확한 식별이 가능한 미토콘드리아 유전자인 시토크롬 c 산화효소 서브유닛 I (COI) 시퀀싱을 통해 이루어집니다. 배양육 생산에서 이 단계는 종 간 오염을 방지하는 데 중요합니다.
이러한 테스트 방법들은 세포주의 무결성을 보호하는 데 도움을 줍니다.프로세스를 간소화하기 위해,
문서화 및 기록 유지 관행
필요한 문서
세포주가 귀하의 시설에 들어오는 순간부터 세포주 출처에 대한 자세한 기록을 유지하는 것이 중요합니다. 여기에는 공급업체 세부정보, 원래 출처 및 ATCC 참조 번호와 같은 카탈로그 번호를 문서화하는 것이 포함됩니다. 이러한 기록은 규제 준수를 보장하는 추적 가능한 체인을 만듭니다 [6].
세포주의 생애 주기 동안, 배치 번호 및 패스 역사를 정확하게 기록하는 것이 필수적입니다. 여기에는 패스 날짜, 관련 인원 및 세포에서 관찰된 변화에 대한 기록이 포함됩니다.이러한 문서는 높은 통과 수가 유전적 변이와 오염의 위험을 증가시키기 때문에 점점 더 중요해집니다 [5][6].
인증 프로필, 테스트 날짜 및 배치 링크는 감사 준비를 위해 안전하게 저장되어야 합니다. 인증 결과가 80% 유전자형 일치 기준을 확인하면, 이 정보는 명확하게 문서화되고 관련 배치와 연결되어야 합니다 [2].
오염 테스트 결과는 명확한 합격 또는 불합격 지표와 함께 기록되어야 합니다. 이러한 기록은 규제 검사 중이나 생산 이상을 처리할 때 중요한 역할을 합니다.
일반적으로 간과되는 단계는 새로운 인수에 대해 ICLAC 잘못 식별된 세포주 등록부와 비교하는 것입니다.각 검증은 문제 있는 세포주 또는 잘못 식별된 세포주를 피하기 위한 적절한 주의 의무를 입증하기 위해 문서화되어야 합니다. [2][3].
추적 가능성 및 준수 유지
상세한 문서화만으로는 충분하지 않습니다 - 준수를 유지하기 위해서는 강력한 추적 가능성 시스템이 필수적입니다. 고유 식별자 시스템을 구현하면 모든 기록이 상호 연결된 상태로 유지됩니다. 각 세포주 배치에 특정 코드를 할당함으로써, 모든 후속 데이터를 연결하여 생산 과정 전반에 걸쳐 원활한 추적 가능성 체인을 유지할 수 있습니다. [6][3].
실험실 정보 관리 시스템(LIMS)과 같은 디지털 솔루션은 인적 오류를 최소화하고 혼동을 방지하는 데 도움을 줍니다. 이러한 시스템은 버전 관리 및 감사 추적이 포함된 안전하고 중앙 집중화된 저장소를 제공합니다.자동 타임스탬프는 모든 변경 사항이 기록되도록 보장하여 규제 기관의 기대를 충족합니다 [6][3].
세포주를 이전할 때, 송신자와 수신자 모두 이전을 반영하기 위해 기록을 업데이트해야 합니다. 여기에는 모든 인증, 출처 및 테스트 이력이 포함되어 추적 가능성이 유지됩니다 [3][6].
정기 감사는 또 다른 주요 관행으로, 잠재적인 격차를 조기에 식별하는 데 도움을 줍니다. 이러한 감사는 직원 교육 및 프로세스 개선의 기회를 제공하여 전반적인 품질 관리 시스템을 강화합니다 [3][6].
일관성을 보장하기 위해, 시설은 문서화를 위한 서면 표준 운영 절차(SOPs)를 수립해야 합니다.이 지침은 라벨링 규칙부터 데이터 입력 프로토콜 및 불일치 해결을 위한 에스컬레이션 프로세스까지 모든 것을 포함해야 합니다. [2].
효율적인 조달 및 준수를 위해,
마지막으로, 준수 문서는 ANSI/ATCC 및 ICLAC와 같은 인정된 표준에 맞춰야 하며, 영국 데이터 보존 규정을 준수해야 합니다. 지속적인 진위를 확인하기 위해 연간 STR 또는 DNA 유전자형 분석을 계획하고 문서화하십시오. [3][4][5].
테스트 빈도 및 타이밍
인증 수행 시기
세포주의 인증은 연구 및 생산의 주요 단계에서 필수적입니다.가장 중요한 인증 순간 중 하나는 새로운 세포주를 획득할 때입니다. 획득 직후 테스트를 수행하면 올바른 재료로 시작하고, 이후 발생할 수 있는 잠재적인 문제를 방지할 수 있습니다. 이 단계는 잘 구조화된 인증 루틴의 기초를 마련합니다.
연장된 배양 기간 동안 인증하는 것도 중요합니다 . 마이크로새틀라이트 안정성(MSS) 세포 배양의 경우, 매 10-20 패시지마다 재인증을 권장하며, MSI 세포 배양의 경우 매 5-10 패시지마다 이 작업이 이루어져야 합니다. 이는 세포주 확장이 광범위하게 발생하는 배양육 생산에서 특히 중요합니다.
이상한 세포 행동 가 관찰되면, 세포주의 정체성을 확인하기 위해 즉각적인 인증이 필요합니다.유사하게, 주요 프로젝트 이정표, 예를 들어 생산 확대, 연구 단계 간 전환 또는 세포 은행 설립 등은 인증을 촉발해야 합니다.
또한, 규제 및 출판 요구사항은 종종 인증을 요구합니다. 많은 저널과 자금 지원 기관은 원고를 수락하거나 보조금 신청을 승인하기 전에 인증 증명을 요구합니다.
테스트 일정 가이드라인
인증을 위한 트리거가 식별되면, 세포주 무결성을 유지하기 위해 명확한 테스트 일정을 준수하는 것이 필수적입니다. 국제 세포주 인증 위원회(ICLAC)와 ANSI/ATCC의 가이드라인은 정기적으로 사용되는 세포주에 대해 연간 최소 두 번 테스트할 것을 권장합니다 [5]. 그러나 이해관계가 더 큰 배양육 생산에서는 더 빈번한 테스트가 필요할 수 있습니다.
재배육 회사의 경우, 테스트 일정은 생산 주기 및 규제 요구 사항과 일치해야 합니다. 분기별 테스트는 고부가가치 연구에 대한 더 나은 감독을 제공하며, 월별 테스트는 오염이 상당한 재정적 손실로 이어질 수 있는 상업 생산 라인에 더 적합할 수 있습니다.
다음 프레임워크는 다양한 시나리오에 대한 권장 테스트 간격을 설명합니다:
| 시나리오 | 권장 테스트 간격 | 목적 |
|---|---|---|
| 새로운 세포주 획득 | 수령 즉시 | 정체성 확인 |
| 정기적인 배양 유지 | 매 3–6개월 | 드리프트 감지 |
| 고통과 세포 배양 (&20회 이상 | 임계값 도달 직후 | 드리프트 합병증 예방 |
| 주요 프로젝트 이정표 이전 | 각 이정표 이전 | 유효성 보장 |
| 새로운 표현형 관찰 | 가능한 한 빨리 | 일관성 확인 | 은행업무 또는 유통 전에 | 각 이벤트 전에 | 진품 보장 |
| 출판 전 또는 보조금 제출 | 제출 마감일 이전 | 규정 준수 충족 |
재배된 육류 시설의 경우, 위험 기반 일정이 보다 맞춤화된 접근 방식을 제공할 수 있습니다.세포주가 빈번한 취급이나 높은 수준의 조작에 노출될 경우, 더 자주 테스트가 필요할 수 있으며, 엄격한 프로토콜에 따라 설정된 세포주는 표준 반기 일정을 따를 수 있습니다.
문서 요구 사항 또한 타이밍 결정에 중요한 역할을 합니다. 예를 들어, 영국 규제 기관은 DD/MM/YYYY 형식의 인증 기록과 명확한 감사 추적을 요구합니다.[2][6]. 테스트 일정을 규제 보고 기간과 일치시키면 모든 필요한 문서가 최신 상태로 유지됩니다.
일정을 간소화하고 규정을 준수하기 위해,
마지막으로, 계절적 요인이 타이밍에 영향을 미칠 수 있습니다.연구 활동이 변동하는 시설의 경우, 조용한 기간 동안 인증 일정을 잡는 것이 실험이나 생산 작업 흐름에 대한 방해를 최소화하는 데 도움이 될 수 있습니다.
sbb-itb-ffee270
규제 준수 및 소싱 가이드라인
규제 요구 사항 개요
이 섹션에서는 특히 영국에서 재배된 고기 생산에 있어 세포주 인증을 규제하는 프레임워크에 대해 다룹니다. 여기서 MHRA와 FSA는 중요한 역할을 합니다. MHRA는 생물학적 물질의 추적 가능성, 안전성 및 품질을 보장하며, 식품 생산에 사용되는 모든 세포주는 인증을 받고 신뢰할 수 있는 공급업체로부터 조달되어야 합니다.유럽 시장으로 확장하려는 기업을 위해, 유럽 식품 안전청 (EFSA)은 세포주에 대한 신원, 안정성 및 안전성의 증명을 요구하며 추가적인 감독을 강화합니다 [6].
앞서 언급했듯이, 정확한 인증과 세심한 문서화는 매우 중요합니다. ANSI/ATCC ASN-0002-2011 표준과 국제 세포주 인증 위원회 (ICLAC)의 권장 사항과 같은 규제 지침은 준수의 기준을 높게 설정합니다. 한때 모범 사례로 여겨졌던 이러한 표준은 이제 재배육 생산에 필수적으로 요구되고 있습니다 [2][4][6].
영국 규제 당국은 기업이 세포주 출처, 배양 이력 및 테스트 결과에 대한 상세한 기록을 유지하도록 요구하여 규제 검사를 위한 완전한 추적 가능성을 보장합니다.비준수는 제품 리콜, 벌금, 시장 승인 거부 또는 심지어 평판 손상과 같은 심각한 결과를 초래할 수 있습니다. 경우에 따라 규제 기관은 인증되지 않은 세포주를 파괴하도록 요구하거나 연구를 반복하도록 요구할 수 있으며, 이러한 지연은 제품 개발 및 상용화 일정에 심각한 영향을 미칠 수 있습니다. [2][6].
인증된 자재 조달
이러한 규제 요구 사항을 충족하는 것은 신뢰할 수 있는 공급업체로부터 인증된 자재를 조달하는 것에서 시작됩니다. 재배된 육류 제품의 유전적 정체성, 안전성 및 일관성은 초기 세포주의 품질에 달려 있습니다. 인증되지 않거나 오염된 세포주를 사용하는 것은 제품 품질을 저하시킬 뿐만 아니라 안전 위험을 초래하고 연구 결과를 무효화합니다. [2][6][7].
공급업체를 선택할 때, 기업은 최근 STR 또는 SNP 프로필, 오염 테스트 결과 및 인정된 기준 준수를 포함한 철저한 인증 문서를 제공하는 공급업체를 우선시해야 합니다. ATCC(미국 유형 배양 집합)와 DSMZ와 같은 저명한 저장소는 인증된 세포주에 대한 기준을 설정합니다. 예를 들어, ATCC는 모든 세포주에 대해 엄격한 인증 및 품질 검사를 수행하여 연구자들이 완전한 추적 가능성을 위해 카탈로그 및 패시지 번호를 인용할 수 있도록 합니다 [6].
특화된 플랫폼, 예를 들어
- 필요한 세포주 및 시약 식별.
- 검증된 플랫폼 또는 인증된 저장소를 통해 공급업체 선택.
- 상세한 인증 문서 검토 및 확보.
- 자재 수령 시 내부 검증 테스트 수행.
- 모든 자재 및 결과에 대한 포괄적인 기록 유지.
- 규제 기준에 따라 정기적인 재인증 일정 수립.
그러나 소싱 및 준수에서의 도전 과제는 흔합니다. 일관되지 않은 공급업체 문서, 표준화된 인증 방법 부족, 배치 간 추적성 유지의 어려움과 같은 문제는 프로세스를 복잡하게 만들 수 있습니다.이러한 문제는 전문 플랫폼을 사용하고, 강력한 내부 기록 유지 시스템을 구현하며, 직원들에게 준수 프로토콜에 대한 정기적인 교육을 제공함으로써 완화할 수 있습니다. [2][6].
ICLAC 잘못 식별된 세포주 등록부는 기업이 새로운 세포주를 획득하기 전에 참고해야 할 귀중하고 무료인 자원입니다. 이 도구는 연구자들이 준수를 위태롭게 할 수 있는 문제 있는 세포주를 피하는 데 도움을 줍니다. 전문가들은 또한 공급자 자격 기준 및 테스트 일정을 상세히 설명하는 세포주 인증에 대한 서면 정책을 작성할 것을 권장합니다. 규제 업데이트에 대한 정보를 유지하고 산업 자원을 활용하는 것은 준수를 유지하고 배양육 제품의 무결성을 보장하는 데 필수적입니다. [1][4][6].
인간 세포주 인증을 위한 완벽한 워크플로우
결론
세포주 인증은 배양육 생산의 성공을 보장하는 데 중요한 역할을 합니다. 연구에 따르면 연구에 사용되는 세포주의 15–20%가 잘못 식별되거나 오염되어 있습니다. 2017년 연구에서는 잘못 식별된 세포주를 사용한 32,000개 이상의 논문이 발표되었으며, 이 문제의 심각한 영향이 과학적 정확성과 상업적 결과에 미칠 수 있음을 강조합니다[3].
이 가이드에서 논의된 모범 사례를 따르면 기업은 규제 장애물, 자원 낭비 및 제품 품질 저하의 위험을 크게 줄일 수 있습니다[5]. 이러한 프로토콜은 세심한 문서화와 결합되어 준수 및 제품 무결성을 유지하는 데 도움을 줍니다.
플랫폼의 부상은
규제 기준도 진화하고 있으며, 2022년과 2023년에 각각 ANSI/ATCC와 ISSCR의 업데이트된 지침이 발표되었습니다[3][7]. 현재 강력한 인증 프로토콜을 작업 흐름에 통합하는 기업들은 향후 규제 요구 사항을 보다 잘 탐색할 수 있는 준비가 되어 있습니다. 정기적인 STR 테스트, 포괄적인 기록 유지 및 신뢰할 수 있는 플랫폼에서의 소싱은 배양육 생산의 과학적 및 상업적 무결성을 보호하기 위한 필수 단계입니다.
이 빠르게 발전하는 분야에서 세포주 인증은 단순한 기술적 요구 사항이 아닙니다. 이는 생산 과정의 모든 단계에서 품질 보증의 초석입니다.
자주 묻는 질문들
세포주 인증이 배양육 생산에 왜 중요한가요?
세포주 인증을 보장하는 것은 배양육 생산의 핵심 단계입니다. 이는 최종 제품의 신뢰성, 안전성 및 전반적인 품질을 보장합니다. 세포주의 정체성과 순도를 확인함으로써 생산자는 교차 오염, 잘못된 식별 또는 유전적 변이와 같은 문제를 피할 수 있습니다. 이러한 문제는 연구 노력을 방해하거나 규제 기준을 충족하지 못할 수 있습니다.
정기적인 테스트, 세심한 기록 유지 및 확립된 산업 표준 준수와 같은 모범 사례를 따르는 것은 생산 과정에 대한 신뢰를 유지하는 데 도움이 됩니다.이러한 정밀도의 수준은 특히 재배된 고기에서 중요합니다. 일관된 품질은 생산 규모를 확장하고 소비자 기대를 충족하는 데 필수적입니다.
연구 및 생산에서 잘못 식별되거나 오염된 세포주를 사용하는 것과 관련된 위험은 무엇입니까?
잘못 식별되었거나 오염된 세포주를 사용하는 것은 연구 및 생산에서 심각한 문제를 일으킬 수 있습니다. 과학자들에게 이는 연구의 신뢰성을 저해하는 신뢰할 수 없는 결과를 의미할 수 있으며, 이는 시간, 돈 및 자원의 낭비로 이어질 수 있습니다. 재배된 고기 생산의 경우, 이러한 오류는 일관되지 않은 제품, 규제 기준 미달, 또는 심지어 안전 문제를 초래할 수 있습니다.
오염은 단일 세포 배양에서 그치지 않고 퍼질 수 있으며, 이는 실험실 작업 흐름에 혼란을 초래하고 지연이나 차질을 일으킬 수 있습니다.이러한 위험을 피하기 위해서는 정기적인 세포주 인증을 수행하고 철저한 문서를 유지하는 것이 중요합니다. 이러한 단계는 작업의 무결성을 보호하고 신뢰할 수 있는 결과를 보장하는 데 도움이 됩니다.
규제 기준을 충족하기 위해 세포주는 얼마나 자주 인증해야 합니까?
세포주는 정기적으로 확인하여 그 정체성, 순도 및 신뢰성을 확인해야 합니다. 이는 연구의 질을 보장할 뿐만 아니라 규제 요구 사항을 충족하는 데도 도움이 됩니다. 전문가들은 새로운 세포주를 획득할 때, 중요한 실험을 시작하기 전에, 그리고 장기간 사용 중에 간격을 두고 인증을 수행할 것을 권장합니다. 대부분의 경우, 이는 세포가 얼마나 자주 사용되는지에 따라 매 3–6개월마다 또는 10–15회 배양 후에 테스트하는 것을 의미합니다.
인증 결과에 대한 철저한 기록을 유지하는 것도 동일하게 중요합니다.이 문서는 규제 준수를 지원하고 귀하의 연구의 무결성을 유지합니다. STR 프로파일링과 같은 일반적인 방법은 세포주 정체성을 확인하는 데 도움을 주며, 마이코플라스마 테스트는 오염 위험을 다룹니다. 이러한 관행을 일관되게 따르는 것은 신뢰할 수 있고 재현 가능한 결과를 보장하며 귀하의 작업이 산업 기대에 부합하도록 유지합니다.
