유전적 안정성은 배양육 생산에 매우 중요합니다. 유전적 안정성이 없으면 세포주가 돌연변이를 일으켜 일관되지 않은 품질, 안전성 위험, 생산 실패로 이어질 수 있습니다. 수천에서 수조 개의 세포로 확장하면 이러한 위험이 증폭되므로 견고한 품질 관리 시스템이 필수적입니다. FDA 및 EMA와 같은 규제 기관은 제품을 승인하기 전에 안정성 증명을 요구하며, 사소한 유전적 변화도 알레르기 반응이나 유해한 결과를 초래할 수 있습니다.
주요 과제에는 유전적 부동, 돌연변이 축적, 종양 유전자 활성화가 포함됩니다. 이러한 문제는 장기간의 세포 계대, 선택적 압력, 생산 중 환경적 스트레스로 인해 발생합니다. 핵형 분석, SNP 배열, 차세대 시퀀싱(NGS)과 같은 고급 테스트 방법은 이러한 위험을 감지하고 해결하는 데 도움을 줍니다. 구조화된 세포 은행 및 표적 유전자 공학과 같은 예방 전략은 불안정성을 방지하는 데 추가적인 안전 장치를 제공합니다.
생산자는 세포 은행에서 대규모 생물 반응기에 이르기까지 생산의 모든 단계에 품질 관리를 통합해야 합니다. STR 프로파일링, 오염 테스트 및 기능 분석과 같은 도구는 일관성과 안전성을 보장합니다.
DNA에서 마스터 세포 은행까지 세포주 개발 가속화 - AGC Biologics
유전적 안정성을 유지하는 데 있어 일반적인 도전 과제
배양육의 생산 주기 전반에 걸쳐 유전적 안정성을 보장하는 것은 쉬운 일이 아닙니다. 생산의 규모가 커질수록 유전적 변화가 발생하고 확산될 기회가 많아집니다. 이러한 도전 과제를 인식하는 것이 효과적인 품질 관리 시스템을 구축하는 데 중요합니다.
유전적 부동과 돌연변이 축적
확장된 세포 배양은 배양육 생산에서 유전체 불안정성의 주요 원인입니다. 불멸화된 세포주는 본질적으로 유전체 변화에 취약하며, 장기 배양 중 자발적인 돌연변이를 일으킬 수 있습니다 [6][5]. 세포가 여러 번의 인구 배가를 거치면서 DNA 복제 오류가 축적되어 다양한 세포 집단이 형성되고, 잠재적으로 기능 상실이 발생할 수 있습니다. Christopher Frye와 Luhong He는 BioPharm International에서 이 문제를 강조합니다:
클론 유래 CHO 세포주는 종종 장기간의 하위 배양을 통해 이질적인 집단으로 변하는 것으로 관찰되었습니다 [6].
산업 환경에서 약 20%의 생산 세포주가 세대가 거듭될수록 상당한 유전자 이질성을 보입니다 [6]. 이러한 돌연변이는 초기 단계에서, 트랜스펙션 후 DNA 복제 중에 발생하거나 외래 유전자가 숙주 게놈에 통합될 때의 오류로 인해 발생할 수 있습니다 [5].
선택적 압력은 또 다른 복잡성을 더합니다. 세포주를 안정화하기 위해 사용되는 항생제 및 대사 마커(e.g. , MTX)와 같은 제제는 실제로 돌연변이율을 증가시킬 수 있습니다 [6][5]. 일부 경우에는 이러한 제제의 농도가 높을수록 돌연변이율이 높아질 수 있습니다 [6]. 영양 부족, 규모 확장 중의 최적이 아닌 배양 조건, 확장에서의 물리적 스트레스와 같은 환경적 스트레스 요인은 유전적 무결성을 더욱 불안정하게 만들 수 있습니다 [6][5].
Shuai Wang, Director of Cell Line Development at WuXi Biologics, notes:
돌연변이 수준은 중국 햄스터 난소(CHO) 세포의 유전체 가소성 때문에 세포 계대 배양 중에 변할 가능성이 높습니다 [5].
후성유전적 변화도 역할을 합니다. 형질전환 유전자는 배양 과정에서 부분적으로 또는 완전히 손실되거나 침묵될 수 있으며, 이는 장기적인 안정성에 영향을 미칩니다. 이러한 축적된 돌연변이는 세포 기능을 해칠 뿐만 아니라 종양 유전자의 활성화 위험을 증가시킵니다.
종양 유전자 활성화 위험
종양 유전자 활성화는 배양육 생산자에게 중요한 안전 문제를 나타내며, 이는 전체 생산 배치를 위협할 수 있습니다. 유전적 불안정성은 과메틸화와 같은 메커니즘을 통해 종양 유전자 활성화를 초래할 수 있으며, 이는 종양과 유사한 프로파일을 초래할 수 있습니다 [3][1]. 생산에서 요구되는 급속한 확장은 이러한 유해한 돌연변이를 축적할 가능성을 더욱 증가시킵니다 [5][6].
이것은 잘 알려진 도전 과제입니다. 국제 혁신 컨소시엄 & 제약 개발 품질 (IQ)에 따르면, 응답자의 67%가 생산 중 아미노산 오삽입보다 유전적 돌연변이가 더 큰 위협을 제기한다고 믿고 있습니다 [5] . 2024년 5월의 사례는 이 문제의 심각성을 보여줍니다: WuXi Biologics는 세포주 개발 프로그램의 클론 중 43%가 동일한 유전적 점 돌연변이를 가지고 있음을 발견했습니다. 근본 원인은? 전통적인 생거 시퀀싱으로 감지되지 않은 트랜스펙션 중 사용된 플라스미드 DNA의 2.1%–2.2% 변이 수준이었습니다. 이를 해결하기 위해 회사는 품질 관리 프로세스에 차세대 시퀀싱(NGS)을 도입하여 이러한 변이를 조기에 포착했습니다 [5].
유전적 이상을 조기에 발견하는 것은 매우 중요합니다. 발암성 변화는 전체 배치를 손상시킬 수 있기 때문입니다. 표준 G-밴드 핵형 분석은 20개의 세포 중기에서 14%의 모자이크성만으로도 비정상적인 하위 집단을 식별할 수 있습니다 [1]. NGS와 같은 더 발전된 기술은 0.5%의 민감도로 클론 세포의 유전적 돌연변이를 감지할 수 있습니다 [5].
DNA 메틸화 분석은 종양 발생 가능성을 평가하는 또 다른 유용한 도구입니다:
DNA 메틸화 수준과 특정 유전자의 과메틸화가 암의 시작과 진행에서 발생하기 때문에, DNA 메틸화 프로파일 분석은 세포의 종양 발생 가능성에 대한 보완 정보를 제공할 수 있습니다 [3].
진정한 도전은 이러한 변화가 안전성을 손상시키기 전에 식별할 수 있는 강력한 모니터링 시스템을 구현하는 데 있습니다.배양육 생산자에게 있어, 빠른 세포 확장 동안 유전적 안정성을 유지하는 것은 고급 품질 관리 조치를 요구합니다.
품질 관리 테스트 방법
배양육 세포주에서 유전적 안정성을 위한 품질 관리 테스트 방법
생산에 영향을 미치기 전에 유전적 불안정을 식별하는 것은 다층적인 테스트 전략을 요구합니다. 배양육 생산자들은 큰 염색체 변화부터 단일 염기 돌연변이까지 모든 것을 감지하는 방법에 의존합니다. 기술 선택은 각 생산 단계에서 존재하는 위험에 따라 달라집니다. 이러한 유전체 도구는 첫 번째 체크포인트로 작용하며, 그 뒤에 상세한 기능 및 오염 평가가 이어집니다.
유전체 및 전사체 분석
G-밴드 핵형 분석은 수적 이상 및 전좌와 같은 큰 구조적 재배열과 같은 주요 염색체 문제를 식별하는 데 중요한 도구입니다. 모자이크 수준을 약 14%까지 감지할 수 있지만, 해상도는 5–10 메가베이스의 변화로 제한되어 있어 더 작은 변화는 감지되지 않을 수 있습니다 [1].
어레이 비교 유전체 혼성화(aCGH)는 1킬로베이스까지 복제 수 변이를 식별하는 더 높은 해상도를 제공합니다. 마찬가지로, 단일 뉴클레오타이드 다형성(SNP) 어레이는 복제 수 변이, 모자이크 이수성 및 단일 부모 이염색체를 감지하는 비용 효율적인 정기 스크리닝 옵션을 제공합니다. 검증 연구에 따르면 SNP 어레이는 매우 재현 가능하며, B 대립유전자 빈도(BAF) 측정값이 인상적인 r² = 0에 도달했습니다.997 [8] [1].
안달루시아 공공 보건 시스템 바이오뱅크의 Rocio Aguilar-Quesada는 방법 결합의 가치를 강조합니다:
핵형 분석은 고해상도 테스트와 함께 사용할 때 특히 다재다능한 분석법으로 남아 있습니다 [1].
단일 반복 서열(STR) 프로파일링은 세포주 정체성을 확인하고 교차 오염을 방지하기 위한 글로벌 표준입니다 [1][9] . 한편, DNA 메틸화 분석은 세포 정체성, 분화 상태 및 세포 노화의 바이오마커로 사용됩니다 [1]. 염기쌍 수준의 돌연변이 검출을 위해서는 전체 유전체 또는 엑솜 시퀀싱 이 옵션이지만, 배열 기반 방법에 비해 비용이 더 높습니다 [1].
이러한 접근 방식을 결합하면 최상의 결과를 얻을 수 있습니다. 넓은 개요를 위해 핵형 분석으로 시작한 다음, aCGH 또는 SNP 배열과 같은 고해상도 도구를 사용하여 더 세밀한 돌연변이를 포착하십시오. 장기간의 배양은 유전적 변화를 초래할 수 있으므로, 이상적으로는 매 10회 통과마다 정기적인 재평가가 중요합니다 [10]. 이러한 유전체 통찰력은 생산 전반에 걸쳐 일관된 세포 행동을 보장하기 위해 기능적 분석으로 보완됩니다.
기능 및 안전성 테스트
유전체 프로파일링만으로는 충분하지 않습니다. 기능적 테스트는 세포가 확장 중에 의도한 특성을 유지하는지 확인합니다. 성장률 및 생산성과 같은 지표는 유전적 표류 또는 오염의 초기 징후를 나타낼 수 있습니다 [9].
고속 대량 시퀀싱 (HTS)은 유전 변이를 감지하는 데 매우 민감하며, 디지털 PCR (dPCR)은 참조 표준 없이도 형질전환체의 안정성을 정확하게 검증합니다 [11]. BioPharm International의 Christopher Frye와 Luhong He는 이 단계의 중요성을 강조합니다:
생산 세포주는 모든 생물공정의 기초이며, 따라서 생산 세포주의 적절한 유전적 특성화는 공정 개발의 성공에 절대적으로 중요합니다 [6].
후성유전적 안정성도 중요합니다. 메틸화 DNA 면역침강법 (MeDIP)은 DNA 메틸화로 인한 유전자 침묵을 식별하는 데 도움을 주며, 이는 생산성 저하의 일반적인 원인입니다 [7]. 유전자 재배열을 검출하기 위해 RT-PCR을 사용하는 Loop Out Detection Assay (LODA)와 같은 도구는 관심 유전자가 삭제되고 선택 가능한 마커가 남아 있을 때 DNA 재배열을 검출합니다 [7].
테스트는 생산 단계와 일치해야 합니다: 초기 단계 테스트는 클로닝 및 플라스미드 검증에 중점을 두고, 중간 단계 테스트는 상업적 조건에서의 위험을 평가하며, 후기 단계 테스트는 세포의 in vitro 수명 한계에서 세포를 평가합니다 [6]. 마스터 세포 은행에서 신선하고 저배수의 세포로 실험을 시작하면 유전적 변이의 위험을 줄일 수 있습니다 [9].
무균 및 오염 테스트
오염 테스트는 유전자를 불안정하게 만들 수 있는 요인을 피하기 위해 필수적입니다. 마이코플라스마는 특히 우려되는 요소로, 배양에서 눈에 보이는 변화를 일으키지 않으면서 세포 대사와 행동을 변화시킵니다 [1]. 연구에 따르면 세포 은행 샘플의 19%에서 마이코플라스마 오염이 발견되었으며, 일부 전문 컬렉션에서는 최대 31%의 비율을 보였습니다 [1] .
민감한 핵산 증폭 기술(NAT) 또는 실시간 PCR을 사용한 정기적인 마이코플라스마 검사는 2-3시간 내에 반정량적 결과를 제공할 수 있습니다 [1]. Hoechst 33258 형광 염색은 또 다른 방법으로, 특유의 세포외 형광 패턴을 드러냅니다 [9].
STR 프로파일링은 세포주에 대한 DNA 지문을 설정하여 교차 오염을 감지하는 기준점으로 작용합니다 [9]. 또한, B 대립 유전자 빈도(BAF) 분포를 사용한 SNP 유전자형 분석은 다른 세포주로부터의 오염을 식별할 수 있으며, 20-25%의 비율로 외부 세포 혼합물을 감지할 수 있습니다 [8].
현미경 관찰은 간단하지만 효과적인 조기 경고 도구로, 비정상적인 세포 형태는 종종 배양 문제를 나타냅니다 [9]. ISO 9001:2015, 와 같은 품질 관리 시스템을 구현하고 Good In Vitro Method Practices (GIVIMP)를 함께 사용하면 표준화되고 재현 가능한 배양 조건을 유지하여 유전체 불안정성의 위험을 줄일 수 있습니다 [10].
특수 테스트 장비 및 재료에 대한 접근이 필요한 배양육 생산자를 위해,
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유전적 불안정성 예방 전략
유전적 불안정성을 감지하는 것과 그것을 예방하는 것은 완전히 다른 도전 과제입니다.유전적 안정성을 유지하기 위해, 배양육 생산자들은 문제가 발생하기 전에 세포주가 변이되는 것을 막는 잘 설계된 시스템이 필요합니다. 여기에는 두 가지 주요 전략이 있습니다: 구조화된 세포 은행과 목표 지향적 유전자 공학. 이 두 접근법은 유전적 변이와 종양 유전자 활성화의 위험을 직접적으로 해결합니다.
세포 은행 및 동결 보존
돌연변이 축적은 실제로 우려되는 문제이므로, 신뢰할 수 있는 세포 은행 시스템이 필수적입니다. 업계 표준은 두 단계 시스템을 포함합니다: 마스터 세포 은행 (MCB)과 작업 세포 은행 (WCB). 이 설정은 생산을 위한 일관된 시작점을 보장합니다. 통과 횟수를 제한하는 것이 중요하며, 각 통과는 돌연변이의 가능성을 증가시킵니다. 세포를 액체 질소에 저장함으로써 생물학적 활동이 효과적으로 중단되어 저장 중 유전적 변화의 위험이 줄어듭니다.
시간을 추적하는 대신, 세포의 나이는 세대 배가로 측정됩니다.. 예를 들어, 일반적인 5,000리터 생산 바이오리액터는 약 30번의 세대 배가를 포함합니다. [6]. 유전적 일관성을 유지하기 위해, 상업적 제조에서는 이 수를 45에서 60번의 배가로 제한합니다.[6].
RT-PCR 및 단일 세포 qPCR과 같은 스크리닝 방법은 비정상적인 mRNA 스플라이싱이나 트랜스진 변동성과 같은 문제를 조기에 발견할 수 있습니다. 복제 수에서 큰 변동성을 보이는 세포주는 미래의 문제를 피하기 위해 폐기해야 합니다.
품질 관리는 타협할 수 없습니다. 놀랍게도, 연구에 따르면 일부 은행의 세포주 중 최대 31%가 마이코플라즈마에 오염된 것으로 나타났습니다.[3] . 이를 방지하기 위해, STR 프로파일링 이 은행 과정 전반에 걸쳐 세포주의 진위성을 확인하는 데 사용됩니다.FSA 연구 및 증거:
은행된 세포가 최종 제품의 시작 재료이기 때문에, 고품질의 안전한 육류 제품을 보장하기 위해 미래에는 규제 기관에 의해 높은 기준이 요구될 수 있습니다.[2] .
안정성을 위한 유전자 공학
유전자 공학은 세포주 안정성을 직접적으로 향상시켜 또 다른 방어층을 제공합니다. 표적 통합 (TI), 특히 재조합효소 매개 카세트 교환 (RMCE), 과 같은 기술은 특정 유전체 위치에 트랜스유전자를 정밀하게 삽입할 수 있게 합니다. 이 접근법은 위치 효과와 복사 수 불안정성이 문제를 일으킬 수 있는 무작위 통합의 예측 불가능성을 피합니다. CHO 세포에서 RMCE의 효율성은 0.1% 미만이지만[12], 결과적으로 생성된 클론은 더 예측 가능하고 안정적입니다.
발현 시스템의 선택도 중요합니다. 예를 들어, 글루타민 합성효소 (GS) 시스템은 일반적으로 세포당 약 5개의 유전자 복사본을 생성하는 반면, 디하이드로폴레이트 환원효소 (DHFR) 시스템은 복사본 수를 최대 1,000개까지 증폭할 수 있습니다[6]. 복사본 수가 많을수록 매력적으로 들릴 수 있지만, 이는 DNA 변형의 가능성을 높여 장기적인 안정성을 위해 GS 기반 시스템이 더 현명한 선택이 됩니다.
위험을 더욱 최소화하기 위해, 부위 특이적 돌연변이 유발 및 사전 트랜스펙션 NGS 스크리닝이 중요합니다. Sanger 시퀀싱은 검출 한계가 높기 때문에, NGS는 0.5% 이하의 플라스미드 돌연변이를 잡아내어 클론 스크리닝 성공률을 90% 이상으로 향상시킬 수 있습니다[5].
WuXi Biologics의 Shuai Wang과 동료들은 이 경계의 중요성을 강조합니다:
공정 최적화로 유전자 수준의 돌연변이를 수정할 수 없으므로, 안정적인 클론의 돌연변이 수준을 철저히 모니터링하십시오.[5].
냉동 보존, 유전자 공학 또는 세포주 특성화에 필요한 전문 도구가 필요한 생산자를 위해,
생산에 품질 관리를 통합하기
모든 생산 단계에 품질 관리를 통합하는 것은 중요합니다. 체계적인 시스템이 없으면 잘 유지된 세포주도 확장 및 규모 확대 중에 변화가 발생할 수 있습니다. 품질 관리는 사후 고려 사항이 아니라 생산의 중심 부분이어야 합니다.이것은 엄격한 관리 시스템과 통제된 환경이 중요한 역할을 하는 확장 단계에서 시작됩니다.
확장 및 스케일업 중 품질 관리
앞서 논의한 바와 같이, 유전체 및 오염 테스트는 특히 스케일업 중에 필수적입니다. 소량에서 수천 리터로 이동하면 새로운 위험이 발생하며, 각 세포 통과는 돌연변이의 가능성을 증가시킵니다. 품질 관리 시스템 (QMS)은 이러한 위험을 효과적으로 관리하는 데 도움을 줍니다. 예를 들어, 2017년부터 2022년까지 Josep M. Canals와 바르셀로나 대학교 팀은 ISO 9001:2015 QMS를 구현하여 인간 다능성 줄기세포 배양을 표준화했습니다. G-밴딩 및 aCGH 데이터의 회고적 분석은 적응 전 조건에 비해 염색체 이상이 크게 감소했음을 보여주었습니다[10][13]. 운하들은 지속적인 모니터링의 중요성을 강조했습니다:
배양 중 hPSCs가 보이는 유전적 불안정성은 실험에 사용하기 위해 계획할 때 유전체 무결성의 빈번한 재평가가 필수 요구 사항임을 나타냅니다[10].
정기적인 유전체 스크리닝은 필수입니다. G-밴딩 핵형 분석 및 aCGH와 같은 기술은 구조적 변화를 감지하며, 차세대 시퀀싱(NGS)은 0.5% 이하 수준의 돌연변이를 식별합니다[5]. 성장 곡선 분석은 오염이나 유전적 드리프트와 같은 문제를 조기에 감지할 수 있습니다[9]. 환경 모니터링은 또 다른 보안 계층을 추가하며, 정착판 테스트 및 6개월마다 HEPA 필터 점검과 같은 관행은 생산 환경이 세포주에 대해 안정적이고 스트레스가 없는 상태로 유지되도록 보장합니다[4] .
미디어와 시약의 일관성은 똑같이 중요합니다. mTeSR1과 같은 혈청이 없는 정의된 미디어를 사용하고 분석 인증서를 가진 시약을 사용하면 배치 간 변동을 줄이고 바이러스 오염의 위험을 제한할 수 있습니다.[10][4]. 정기적인 형태학 검사 - 다양한 배양 밀도에서의 간단한 현미경 관찰 -는 분화 또는 스트레스의 초기 징후를 포착할 수 있습니다.[9]. 특수 장비나 시약을 조달하기 위해,
제품 일관성을 위한 기능적 분석
유전체 모니터링이 과정을 보호하는 동안, 기능적 분석은 세포가 의도한 대로 작동하는지 확인합니다.유전적 안정성만으로는 충분하지 않습니다. 세포는 또한 생산 배치 전반에 걸쳐 적절하게 기능할 수 있는 능력을 유지해야 합니다. 배양육에서는 근육 위성 세포와 같은 줄기 세포가 확장 후에도 여전히 성숙한 근육이나 지방 조직으로 분화할 수 있는지 확인하는 것을 의미합니다[2]. 분화 분석은 이를 검증하는 데 필수적입니다.
MTT, LDH, Resazurin과 같은 대사 분석은 세포의 건강과 생존 가능성에 대한 통찰력을 제공합니다[4][9]. 이들은 단일 반복 서열(STR) 프로파일링, 과 결합하여 생산 과정 전반에 걸쳐 세포주가 진정성을 유지하고 교차 오염이 없음을 확인하는 데 도움을 줍니다[1][9].
전사 분석은 또 다른 중요한 단계입니다.샤오위에 첸과 샘 장의 추천:
돌연변이 검출을 위해 전사 수준에서의 위험 평가를 위해 게놈 DNA 시퀀싱보다는 cDNA 시퀀싱이 권장됩니다.[5].
이 방법은 유전자 위치만을 반영하는 것이 아니라 유전자가 어떻게 발현되는지를 반영하기 때문에 최종 제품에 대한 보다 정확한 그림을 제공합니다. 게놈 스크리닝과 기능적 분석을 결합함으로써, 생산자는 모든 단계에서 안전성, 품질 및 성능에 대한 엄격한 기준을 충족하는지 확인할 수 있습니다.
결론
유전적 안정성을 유지하는 것은 배양육을 안전하고 일관되게 생산하는 데 중요합니다. 줄기세포 및 재생 의학 연구소의 프란시스코 J. 몰리나-루이즈와 그의 동료들은 위험성을 강조합니다:
hPSC의 유전적 변화는 hPSC 기반 세포 제품의 안전성을 위협할 수 있습니다...하지만 시작 물질의 이질적인 분화 성향, 유전자 발현 프로파일의 변화 및 최종 세포 제품의 비효율성으로 이어질 수 있습니다 [10].
위험은 상당합니다 - 531개 이상의 잘못 식별된 세포주가 국제 세포주 인증 위원회에 의해 기록되었습니다 [1].
이 문제를 해결하려면 강력한 품질 관리 프레임워크가 필요합니다. 여기에는 STR 프로파일링, G-밴딩 핵형 분석, aCGH 및 고급 NGS와 같은 방법을 결합하는 것이 포함됩니다 [5], ISO 9001:2015와 같은 시스템과 함께 프로세스를 표준화하고 염색체 이상을 최소화합니다 [13].
경제적 요인 또한 이러한 조치의 필요성을 촉진합니다.유전적 부동은 돌연변이 세포가 성장 우위를 얻어 전체 생산 배치를 망칠 수 있습니다 [10][11]. 인간 다능성 줄기세포에 대한 관심이 증가함에 따라 안정적인 세포주에 대한 수요가 그 어느 때보다 높아졌습니다. 터프츠 대학교의 David L. Kaplan 교수는 다음과 같이 설명합니다:
불멸화된 세포주는 안정적이고 견고한 생물공정에서 대량의 식용 조직을 생성하기 위한 필수 요건으로 일반적으로 간주됩니다 [14].
배양육 생산자에게 품질 관리는 플라스미드 스크리닝에서 대규모 생산 모니터링에 이르기까지 모든 단계에 내재되어야 합니다. 철저한 테스트와 예방 전략을 결합함으로써 생산자는 일관되고 신뢰할 수 있는 결과를 보장할 수 있습니다.
자주 묻는 질문
확대 과정에서 유전적 안정성 검사는 얼마나 자주 수행해야 합니까?
유전적 안정성 검사는 확대 과정에서 중요한 단계이며 정기적으로 수행해야 합니다. 이 검사의 빈도는 주로 특정 세포주와 관련된 프로세스에 따라 달라집니다. 돌연변이 가능성을 줄이고 세포의 줄기성을 유지하기 위해 유전적 분석에 기반한 통과 한계를 설정하는 것이 현명합니다.
작은 돌연변이와 큰 염색체 변화를 가장 잘 감지하는 테스트는 무엇입니까?
SNP 배열 분석 및 전장 SNP 유전자형 분석과 같은 테스트는 작은 돌연변이, 복제 수 변화 및 이수성을 감지하는 데 유용합니다. 이러한 방법은 특히 세포주에서 큰 염색체 변화를 식별하는 데 유용합니다.
생산 배치 간의 유전적 부동을 방지하는 가장 간단한 방법은 무엇입니까?
유전적 부동을 최소화하려면 세포주의 정기적인 유전 및 기능 분석을 수행하고 통과 횟수를 제한하는 것이 중요합니다. 마스터 세포 은행을 설립하고 유전적 안정성을 정기적으로 확인하는 것과 같은 관행을 구현하십시오. 이러한 조치는 일관성을 유지하고 다양한 생산 배치에서 신뢰할 수 있는 결과를 보장하는 데 중요합니다.
