שוק ה-B2B הראשון בעולם לבשר מתורבת: קרא את ההודעה

כיצד ערבוב משפיע על צמיחת תאים בבשר מתורבת

How Agitation Affects Cell Growth in Cultivated Meat

David Bell |

הנעה היא קריטית בייצור בשר מתורבת, ומבטיחה שהתאים מקבלים חמצן וחומרים מזינים תוך הימנעות מהצטברות פסולת. עם זאת, הנעה מוגזמת גורמת לבעיות כמו ניתוק תאים, נזק לממברנה וצמיחה מופחתת. מציאת האיזון הנכון היא חיונית, במיוחד בביו-ריאקטורים בקנה מידה גדול, שבהם אפילו התאמות קטנות יכולות להשפיע על הייצור.

נקודות מפתח:

  • הנעה אופטימלית: מחקרים מראים ש-60 סל"ד בריאקטורים עם מיכל מעורבל הוא אידיאלי לאיזון בין אספקת חומרים מזינים ולחץ גזירה.
  • סוגי ביו-ריאקטורים:
    • מיכל מעורבל: ערבוב יעיל אך סיכון ללחץ גזירה גבוה.
    • ביו-ריאקטורים גליים: ערבוב עדין, מוגבל על ידי העברת חמצן.
    • מערכות אוויריות: ערבוב אחיד עם לחץ נמוך אך דורשות שליטה מדויקת.
  • אמצעי הגנה: תוספים כמו Poloxamer 188 וחמצון ללא בועות מפחיתים נזק לתאים.
  • אתגרי הגדלה: מערכות גדולות יותר מגבירות את הסיכון לגזירה, ודורשות ניטור מדויק ודגמי CFD.

שמירה על שליטה מדויקת בתסיסה היא קריטית להגדלת ייצור בשר מתורבת תוך הגנה על שלמות התאים.

כיצד תסיסה משפיעה על גדילה והישרדות של תאים

מה מראים מחקרים עדכניים

מחקרים עדכניים זיהו ספי תסיסה ספציפיים שמשפיעים על גדילה והישרדות של תאים. לדוגמה, מחקר ABM-CFD עם תאי FS-4 על מיקרונשאים בביו-ריאקטור של 100 מ"ל עם ערבול חשף ש-60 סל"ד הוא מהירות הערבול האופטימלית. במהירות זו, חומרים מזינים וחמצן מופצים באופן שווה, עם מתח גזירה שנשאר בין 0–80 mPa. עם זאת, חריגה מ-60 סל"ד מובילה לנזק לתאים והתנתקות עקב כוחות מוגברים.ב-220 סל"ד, מספר ריינולדס של האימפלר מזנק מ-1,444 ל-5,294.7, מה שמסמן מעבר לזרימה טורבולנטית. טורבולנציה זו יוצרת מערבולות קטנות יותר מהמיקרונשאים, שיכולות לפגוע בתאים ובממברנות שלהם [2].

מחקר נוסף המתמקד בתאי גזע מזנכימליים שמקורם בחבל הטבור האנושי הדגיש כיצד אפילו עליות קלות בעוצמת הערבול מפחיתות באופן משמעותי את שיעורי ההידבקות. זה מדגים את הרגישות הגבוהה של תאים נצמדים ללחץ מכני [6].

ממצאים אלו מדגישים את החשיבות של כיול מדויק של מהירויות הערבול, שנשאר תחום מרכזי לשיפור מתמשך.

מציאת עוצמת הערבול הנכונה

האתגר העיקרי הוא איזון בין מהירות הערבול המינימלית הנדרשת להשעיית מיקרונשאים (N<sub>js</sub>) מבלי לחצות את גבולות הלחץ הגזירה.עבור תאי בשר, התנאים האידיאליים כוללים קצב פיזור אנרגיה של כ-1 mW·kg⁻¹ וזמן ערבוב מתחת ל-10 שניות [1].

"שמירה על סביבה מיקרו ומקרו-סביבתית נוחה לתאים מבלי לחשוף אותם ללחץ מכני מוגזם מערבוב תדרוש חדשנות ואופטימיזציה של עיצובים ותהליכים של ביוריאקטורים" [2].

ערבוב מוגזם יכול לגרום לשני אפקטים מזיקים: מוות תאי מיידי כאשר הלחץ עובר סף קריטי, ולחץ מצטבר המוביל לשקט תאי. שני התוצאות פוגעות בפרודוקטיביות. זה הופך את השליטה המדויקת בעוצמת הערבוב לגורם קריטי להצלחה מסחרית, במיוחד בייצור בקנה מידה גדול. במערכות עם נפחים גדולים כמו 20 מ³, אפילו ערבוב מינימלי יכול לגרום לניתוק תאים, מה שמדגיש את המורכבות של הגדלת קנה המידה תוך שמירה על חיות התאים.

מבוא לביוראקטורים: ערבוב, ערבול & גזירה

שיטות ערבוב ביוראקטור והשפעותיהן

Bioreactor Types Comparison for Cultivated Meat Production

השוואת סוגי ביוראקטורים לייצור בשר מתורבת

השוואת מערכות ביוראקטור שונות

העיצוב של ביוראקטור משחק תפקיד קריטי באיזון הפצת חומרים מזינים וניהול לחץ מכני. כל סוג של ביוראקטור יוצר תנאי ערבוב ייחודיים, המשפיעים ישירות על הישרדות התאים והתפוקה. בחירת המערכת הנכונה פירושה מציאת איזון בין אספקת חומרים מזינים יעילה לבין צמצום כוחות מכניים שעלולים לפגוע בתאים.

ביוראקטורים עם מיכל מעורבל מסתמכים על מערבלים מכניים לערבוב התרבות. מערבלי רושטון מייצרים זרימות רדיאליות, מה שמוביל לאזורי גזירה מקומיים, במיוחד ליד קצות המערבל.לעומת זאת, מערבלים עם להבים משופעים ולהבים ימיים יוצרים זרימות עדינות יותר, המתאימות יותר לתאים יונקים עדינים. מחקר שנערך במרץ 2025 על ידי מעבדת המפתח הלאומית להנדסת ביוריאקטורים בשנגחאי השווה את ביצועי תאי CHO-K1 בביו-ריאקטורים עם מיכל מעורבל וביו-ריאקטורים מנוערים במסלול. המערכת עם המיכל המעורבל השיגה 71.6 × 10⁶ תאים/מ"ל ב-520 סל"ד, בעוד שהמערכת המנוערת במסלול הגיעה ל-83 × 10⁶ תאים/מ"ל ב-100 סל"ד בלבד [4].

ביו-ריאקטורים עם גלים (נדנוד) מבטלים את הצורך במערבלים לחלוטין, תוך שימוש בשקית חד-פעמית שמתנדנדת על מגש ליצירת גלים עדינים לערבוב. סביבה זו עם גזירה נמוכה אידיאלית לקווי תאים עדינים. עם זאת, מערכות אלו תלויות באוורור שטחי, מה שיכול להגביל את העברת החמצן בתרביות בצפיפות גבוהה. כדי לשמור על יצירת גלים יעילה, נפח העבודה מוגבל ל-50% מהקיבולת הכוללת של השקית [7].

html

ביוריאקטורים מסוג Airlift משתמשים בערבוב פנאומטי, שבו גז מתפזר ומסחרר את הנוזל בין עלייה לירידה. ללא חלקים נעים פנימיים, מערכות Airlift מספקות פיזור אנרגיה אחיד וכוחות גזירה נמוכים יותר בהשוואה למיכלים מעורבלים. בניגוד לביוריאקטורים מסוג גל, עיצובים של Airlift מציעים העברת חמצן טובה יותר בשל הסירקולציה היעילה שלהם [7].

סוג ביוריאקטור מנגנון ערבוב מתח גזירה צפיפות תאים שהושגה מגבלה עיקרית
מיכל מעורבל מערבל מכני גבוה (ממוקד) 71. 6 × 10⁶ תאים/מ"ל סיכון לנזק לקצה המניע
נערך במסלול מעגלי סיבוב כלי בינוני 83 × 10⁶ תאים/מ"ל שיאי מתח גזירה
גל (נדנוד) נדנוד אופקי נמוך מאוד גבוה העברת חמצן מוגבלת
הנפה אווירית פיזור גז נמוך (אחיד) גבוה דורש שליטה מדויקת בגז

"במגיבים עם מערבלים... ערבוב מקומי של המניע יוצר גרדיאנטים גדולים של גזירה שגורמים לתאים לחוות לחץ מכני." – Cellexus [7]

כאשר הביוגרים מתרחבים, הפשרות בין יעילות הערבוב והגנת התאים הופכות ליותר ברורות.מערכות מיכלים מעורבבות יעילות מאוד בהפצת חומרים מזינים אך דורשות התאמות מהירות זהירות כדי להימנע מפגיעה בתאים באזורי גזירה גבוהים. מצד שני, ביוריאקטורים של גל ואוויר מספקים ערבוב עדין יותר, מה שמפחית את הסיכון ללחץ גזירה, אם כי הם עשויים להיאבק באספקת חמצן בתרבויות צפופות. השוואות אלו מדגישות את האיזון העדין הנדרש כדי לייעל עיבוד ביולוגי בקנה מידה גדול תוך הגנה על שלמות התאים.

הפחתת לחץ גזירה ושיפור צמיחת תאים

עיצובים חדשים של ביוריאקטורים ותוספים מגנים

מזעור לחץ גזירה חיוני לקידום צמיחת תאים בייצור בשר מתורבת. חידושים בעיצוב ביוריאקטורים ושימוש בתוספים מגנים שיפרו משמעותית את חיות התאים ויעילות הערבוב.גישה מבטיחה אחת כוללת ביוריאקטורים מנוערים במסלול, אשר מסתמכים על תנועת הכלי ואוורור פני השטח כדי להימנע מכוחות גזירה מזיקים הנגרמים על ידי ערבוב מונע מדחף וקריעת בועות. מערכות אלו הראו תוצאות מרשימות, עם תפוקה של 83 × 10⁶ תאים/מ"ל, בהשוואה ל-71.6 × 10⁶ תאים/מ"ל במערכות טנק מעורבלות מסורתיות [4].

במערכות טנק מעורבלות, הגיאומטריה של המדחף גם עושה הבדל. מדחפי רושטון רדיאליים יוצרים דפוסי זרימה המאפשרים לתאים להתאושש באזורים "רגועים", מה שמפחית את ההשפעה של כוחות גזירה גבוהים. כפי שצפו חוקרים מ-TTP:

תאים בריאקטורים עם מדחף רושטון רדיאלי מתאוששים במהלך שלבים רגועים, בניגוד לאלו במערכות עם מדחף צירי כפול [5].

לתוצאות מיטביות בייצור בשר מתורבת, יש לשמור על מהירות קצה המדחף בטווח של 0.6–1.8 m/s מומלץ להגן על צמיחת תאים [9].

תוספים מגנים כמו פולוקסמר 188 (Pluronic F-68) משחקים תפקיד מרכזי על ידי הפחתת מתח הפנים בממשק גז-נוזל, ומגנים על תאים מפני נזק במהלך היווצרות והתפוצצות בועות. הריכוז האידיאלי לפולוקסמר 188 הוא 1 g/L, שכן כמויות גבוהות יותר מספקות תועלת נוספת מועטה [9]. עבור תאים נצמדים שגדלים על מיקרונשאים, משטר ערבוב לסירוגין יכול לשפר עוד יותר את התוצאות. לדוגמה, שימוש בתבנית של 30 דקות כבוי ו-5 דקות פועל במהלך שלב הזריעה מעודד העברת חרוז לחרוז תוך מזעור לחץ הידרודינמי. גישה זו אפשרה לתאי לוויין בקר להגיע לצפיפות של 3 × 10⁶ תאים/mL [3].

בנוסף לאסטרטגיות העיצוב וההוספה הללו, שיפור אספקת החמצן יכול להפחית עוד יותר את הלחץ הגזירה.

שימוש בחמצון ללא בועות

חמצון ללא בועות מציע דרך יעילה נוספת להגן על תאים מנזקי גזירה. קריעת בועות בממשק הגז-נוזל יכולה לייצר שיעורי פיזור אנרגיה גבוהים כמו 10⁶ עד 10⁸ W/m³, הרבה מעבר לסף התת-קטלני של 10⁴ W/m³ שרוב התאים היונקים יכולים לסבול [9] . על ידי ביטול הבועות, שיטה זו מסייעת להגן על תרבויות בצפיפות גבוהה.

איוורור פני השטח, הנפוץ בשימוש בביו-ריאקטורים מתנדנדים ומטלטלים, יעיל במיוחד בהפחתת כוחות גזירה.כפי שהודגש במחקר שנערך לאחרונה:

OSBs מנצלים את תנועת גוף הכלי ואוורור פני השטח כדי להפחית ביעילות נזקי גזירה הנגרמים על ידי להבי מערבל מסורתיים ויצירת בועות או שבירתן [4].

ביוריאקטורים מתנדנדים מראים גם הבטחה לייצור בשר מתורבת. הם מציעים יתרונות כמו חד פעמיות, עלויות תפעול נמוכות וסביבה הידרודינמית עדינה [8].

עם זאת, אוורור פני השטח אכן מתמודד עם אתגרים בצפיפות תאים גבוהה מאוד. לדוגמה, ביוריאקטור מנוער אורביטלית השיג מקדם העברת מסה של חמצן (kLa) של 20.12 h⁻¹ ב-100 סל"ד, תומך תאורטית בצפיפות תאים של עד 118 × 10⁶ תאים/מ"ל .בפועל, כאשר צפיפות התאים עולה על 80 × 10⁶ תאים/מ"ל, צמיגות ההשעיה עולה, מה שמוביל להתנהגות לא ניוטונית, דלילת גזירה, שמפחיתה את יעילות העברת החמצן. זה מדגיש את הצורך באופטימיזציה זהירה ככל שצפיפות התאים עולה.

שליטה בתסיסה לייצור בקנה מידה גדול

התאמת מהירויות ערבוב ומערכות ניטור

במערכות בקנה מידה גדול, שמירה על שליטה מדויקת בתסיסה היא קריטית. ב-24 השעות הראשונות, מומלץ לשמור על מהירויות ערבוב בין 30–50 סל"ד כדי לאופטימיזציה של הצמדת תאים לנשאים מיקרוסקופיים [6] . מחקר מאוניברסיטת מזרח סין למדע וטכנולוגיה ביוני 2022 מדגיש את חשיבות הגישה הזו: ב-45 סל"ד, תאי גזע מזנכימליים שמקורם בחבל הטבור האנושי השיגו 98.68% שיעור היצמדות ביום הראשון, בעוד שהגברת המהירות ל-55 סל"ד גרמה לשיעורי ההיצמדות לצנוח ל- 51.32% [6] .

לאחר שלב ההיצמדות, יש להגדיל את הערבול מעט מעל מהירות ההשעיה (N₍JS₎) כדי למנוע התגבשות תאים. מחקרים מראים כי שמירה על עוצמת ערבול קרוב ל-1.3 × N₍JS₎ תומכת בצמיחת תאים, בעוד שחריגה מכך ל-2 × N₍JS₎ מעכבת צמיחה עקב ירידה ביעילות ההיצמדות [10] .

ניטור מתמשך הוא קריטי, בהתחשב במרווחים התפעוליים הצרים. מערכות כמו הביוראקטור BioStar 1.5c משתמשות בתוכנה מתקדמת להתאמת ערבול וזרימת גז על בסיס משוב בזמן אמת מחיישני חמצן מומס (DO) ו-pH [6].חיישני DO אופטיים ממלאים תפקיד מרכזי כאן, ומציעים את הדיוק הנדרש לכוונן את הערבול רק כאשר רמות ה-DO יורדות מתחת לסף שנקבע - בדרך כלל סביב 40% - ובכך למזער את הלחץ הגזירה [7] [6]. הצוות של מזרח סין השתמש בשיטה זו באמצעות מטלר טולדו פרובים, ושמר על DO ב-40% ו-pH ב-7.2. גישה זו הביאה לצפיפות תאים מקסימלית של 27.3 × 10⁵ תאים/מ"ל, שיפור של פי 2.9 על פני טכניקות תרבות אצווה סטנדרטיות [6].

בעת הגדלה, מודלים של דינמיקת נוזלים חישובית (CFD) הם בעלי ערך רב לקביעת מהירות המניפה האופטימלית להשעיית מיקרונשאים מבלי לחרוג ממגבלות הגזירה [10][6]. במקום פשוט להתאים את ה-rpm בין הכלים, ניתוח CFD מציע ליישר את קצב הגזירה הממוצע בנפח בין הריאקטורים. זה מבטיח כי הסביבה ההידרודינמית בביו-ריאקטור גדול יותר - כמו מעבר מבקבוק ספינר של 200 מ"ל לביו-ריאקטור של 1.5 ליטר - נשארת מתאימה לצמיחת תאים [6].

אסטרטגיות אלו מדגישות את החשיבות של שליטה ומעקב מדויקים בעת המעבר למערכות ביו-ריאקטור מתקדמות.

מציאת ציוד מיוחד דרך Cellbase

Cellbase

מציאת הציוד הנכון לייצור בשר מתורבת יכולה להיות מאתגרת. פלטפורמות אספקה מעבדתיות סטנדרטיות לעיתים קרובות אינן מתאימות לצרכים הספציפיים של תחום זה, כמו מערבלים בעלי גזירה נמוכה או חיישני חמצן מומס אופטיים המותאמים לתרביות תאים יונקים בצפיפות גבוהה. כאן Cellbase מהווה ערך רב לצוותי מחקר וייצור.

כמרכז המסחר הראשון המוקדש לתעשיית הבשר המתורבת, Cellbase מחבר בין חוקרים לספקים אמינים של רכיבי ביוריאקטור, חיישני ניטור ומערכות מיקרונשאים שתוכננו במיוחד עבור מגזר זה. הרישומים המותאמים של הפלטפורמה כוללים מפרטים מפורטים - כגון תאימות עם שלדים, מערכות ללא סרום או עמידה ב-GMP - מה שמקל על מציאת ציוד שעונה על הדרישות הטכניות המדויקות של התהליך שלך. עבור צוותים המגדילים את הייצור מבקבוקי סיבוב למערכות ביוריאקטור אוטומטיות, Cellbase מפשט את הרכש על ידי מתן גישה ישירה לספקים שמבינים את האתגרים הייחודיים של ייצור בשר מתורבת. זה חוסך זמן ומפחית את הסיכון לחוסר התאמה טכנית.

בין אם אתה משדרג את מערכות הניטור שלך או מחפש רכיבים מיוחדים, פלטפורמות כמו Cellbase מייעלות את התהליך, ומבטיחות שיש לך את הכלים הנכונים לקידום הייצור.

סיכום

השגת האיזון הנכון בין אספקת חמצן וחומרים מזינים תוך הימנעות מלחץ גזירה מזיק היא המפתח לאופטימיזציה של ערבוב בביו-ריאקטורים לבשר מתורבת. מחקרים מראים שניתן להשיג זאת על ידי בחירת עיצובים נכונים של ביו-ריאקטורים, כוונון מהירויות ערבוב ושימוש באסטרטגיות הגנה.

טכניקות כמו ערבוב לסירוגין, מערבלים רדיאליים מסוג רושטון והתאמות בזמן אמת המנוטרות באמצעות CFD (דינמיקת נוזלים חישובית) משחקות תפקיד גדול בהבטחת התאוששות תאים וצמיחתם היציבה. כאשר הייצור מתרחב מבקבוקוני מעבדה לנפחים תעשייתיים, הבנת התנהגות נוזלים לא-ניוטוניים ושמירה על סולמות אורך קולמוגורוב עקביים הופכים לקריטיים כדי להימנע מנזק מכני. התקדמויות אלו מקלות על הגנת תאים ומפשטות את מאמצי ההרחבה.

פלטפורמות כגון Cellbase תומכות בתהליך זה על ידי חיבור חוקרים עם ספקים שמבינים את הדרישות הספציפיות של ייצור בשר מתורבת. גישה מותאמת זו מסייעת למזער בעיות טכניות ומאיצה את המעבר מניסויים בקנה מידה קטן לפעילות מסחרית בקנה מידה מלא.

שאלות נפוצות

אילו בעיות עלולה לגרום תסיסה מוגזמת בביו-ריאקטורים לייצור בשר מתורבת?

תסיסה מוגזמת בביו-ריאקטורים יכולה להיות בעיה חמורה בייצור בשר מתורבת, שכן היא עלולה להשפיע לרעה על גדילה והישרדות של תאים. ערבוב נמרץ יוצר לחץ גזירה גבוה, שיכול לפגוע בתאי בעלי חיים עדינים. סוג זה של לחץ מכני יכול לגרום לנזק לממברנת התאים, להפחית את החיות ואפילו לעכב את התפתחות הרקמה.

כדי למנוע אתגרים אלו, חשוב לכוון במדויק את פרמטרי התסיסה.המטרה היא למצוא איזון בין העברת חומרים מזינים וחמצן ביעילות לבין צמצום הלחץ המכני. גורמים מרכזיים כמו עיצוב מערבל, מהירות ערבוב וגיאומטריית הביוראקטור חייבים להיות מותאמים בקפידה כדי לשמור על תאים בריאים ופרודוקטיביים לאורך תהליך הגידול.

כיצד משפיעה בחירת הביוראקטור על צמיחת התאים והחיות בייצור בשר מתורבת?

בחירת הביוראקטור בייצור בשר מתורבת היא קריטית, שכן היא משפיעה ישירות על צמיחת התאים ובריאותם על ידי השפעה על גורמים כמו יעילות ערבוב, העברת חמצן ולחץ גזירה.

ביוראקטורים מסוג טנק מעורבל הם אפשרות פופולרית לייצור בקנה מידה גדול מכיוון שהם מציעים שליטה מדויקת על תנאים אלה. עם זאת, הם יכולים גם לייצר כוחות גזירה שעלולים לפגוע בתאים עדינים, ולכן חשוב לכוונן את עיצובי המערבלים והפרמטרים התפעוליים כדי למזער נזק.

html

עיצובים אחרים, כגון ביוריאקטורים מסוג איירליפט, הם פשוטים יותר וצורכים פחות אנרגיה. אך הם עשויים לא לספק את אותה רמת שליטה על הערבוב, מה שעלול להשפיע על צמיחת התאים. מצד שני, ביוריאקטורים מסוג סיבים חלולים מחקים כלי דם כדי לתמוך בצפיפות תאים גבוהה, אם כי הגדלתם יכולה להיות אתגר.

בחירת הביוריאקטור הנכון מסתכמת במציאת האיזון הנכון בין גורמים כמו יכולת הגדלה, עלות והצרכים הספציפיים של התאים כדי להבטיח שהם יגדלו וישגשגו ביעילות לייצור בשר מתורבת.

כיצד ניתן להפחית את הלחץ הגזירה במהלך ייצור בשר מתורבת בקנה מידה גדול?

מזעור לחץ הגזירה בייצור בשר מתורבת בקנה מידה גדול דורש התאמות זהירות לעיצוב ותפעול הביוריאקטור. גורמים כמו סוג מערבל, צורת הריאקטור והגדרות הערבוב משחקים תפקיד מרכזי.לדוגמה, הפחתת מהירויות קצה של האימפלר או בחירה בעיצובים ספציפיים של אימפלר יכולים להוריד את כוחות הגזירה תוך שמירה על ערבוב נכון ואספקת חמצן, שהם קריטיים לצמיחת תאים.

כלי שימושי נוסף בתהליך זה הוא דינמיקת נוזלים חישובית (CFD). סימולציות CFD מאפשרות למהנדסים לחקור דפוסי זרימה והתפלגות גזירה בפירוט, ולעזור להם לבצע שינויים מושכלים בעיצוב. בנוסף, ביוריאקטורים מתנדנדים או מעורבבים בגלים מציעים חלופה עדינה יותר למערכות טנק מעורבבות מסורתיות, שכן הם מייצרים באופן טבעי כוחות גזירה נמוכים יותר. שילוב ניטור בזמן אמת עם חיישנים מתקדמים ואלגוריתמים של בקרת חיזוי יכול לעזור לשמור על מתח גזירה בגבולות בטוחים, ולהבטיח תהליך ייצור חלק יותר.

פוסטים קשורים בבלוג

Author David Bell

About the Author

David Bell is the founder of Cultigen Group (parent of Cellbase) and contributing author on all the latest news. With over 25 years in business, founding & exiting several technology startups, he started Cultigen Group in anticipation of the coming regulatory approvals needed for this industry to blossom.

David has been a vegan since 2012 and so finds the space fascinating and fitting to be involved in... "It's exciting to envisage a future in which anyone can eat meat, whilst maintaining the morals around animal cruelty which first shifted my focus all those years ago"