ISO 14644 estabelece os padrões para a qualidade do ar em salas limpas, crucial para indústrias que utilizam sistemas de produção de carne cultivada. As diretrizes cobrem limites de partículas, estratégias de monitoramento e métodos de controle de contaminação. Aqui está o que você precisa saber:
- ISO 14644-1: Define classes de limpeza (ISO 1 a ISO 9) com base na contagem de partículas. Por exemplo, a Classe ISO 5 permite até 3.520 partículas (≥0,5 µm/m³).
- ISO 14644-2: Foca no monitoramento baseado em risco, garantindo conformidade em condições "em repouso" e "em operação".
- Métricas Principais: Monitore contagens de partículas, diferenciais de pressão (10–15 Pascais), temperatura (18–22°C) e umidade (30–60%).
- Métodos: Use Contadores de Partículas Aéreas por Dispersão de Luz (LSAPC), amostragem de ar microbiana e testes de superfície para detectar contaminação.
- Automação: Sistemas de monitoramento contínuo fornecem dados em tempo real, reduzindo riscos e melhorando a conformidade com padrões regulatórios como FDA 21 CFR Parte 11.
O monitoramento adequado previne contaminação, protege produtos e garante conformidade com os padrões de salas limpas.
Normas de Classificação de Salas Limpas ISO 14644 e Principais Parâmetros de Monitoramento
Criando um Plano de Monitoramento Baseado em Risco
Realizando Avaliações de Risco
Quando se trata de monitoramento de salas limpas, adotar uma abordagem baseada em risco garante que o processo de monitoramento esteja alinhado de perto com as condições reais de operação. Não se trata de seguir modelos genéricos - é sobre adaptar o plano aos riscos específicos do seu ambiente.
De acordo com a ISO 14644-2:2015, os planos de monitoramento devem estar baseados em avaliações formais de risco [3][4]. Ferramentas como HACCP e FMEA são particularmente úteis para identificar sistematicamente riscos de contaminação e localizar pontos críticos de controle onde produtos de carne cultivada entram em contato direto com o ambiente da sala limpa. Também é crucial diferenciar entre condições "em repouso" (quando o equipamento está funcionando sem pessoal) e estados "em operação" (durante a produção normal), pois a atividade do pessoal pode aumentar significativamente os níveis de partículas [1].
Não negligencie espaços adjacentes como antecâmaras, salas de vestimenta e corredores. Essas áreas desempenham um papel vital na manutenção de cascatas de pressão adequadas, que são essenciais para o controle de contaminação.A orientação regulatória também enfatiza a necessidade de planos de monitoramento que incluam esses espaços adjacentes e incorporem verificações ambientais específicas por lote para mitigar riscos de contaminação.
Selecionando Locais e Parâmetros de Monitoramento
Escolher os locais certos para sensores é fundamental para um monitoramento eficaz. Comece mapeando todas as áreas classificadas e zonas de apoio. Os sensores devem ser estrategicamente posicionados para coletar dados representativos sem interferir nas operações. Priorize áreas onde a carne cultivada está exposta, pontos de entrada de pessoal e espaços adjacentes a zonas de classificação inferior.
Um plano de monitoramento robusto deve ir além de apenas contar partículas. Deve também rastrear parâmetros chave como tamanhos de partículas no ar (variando de 0,1 µm a 5 µm), diferenciais de pressão do ar, temperatura (tipicamente 18–22°C) e umidade relativa (30–60%).Níveis elevados de umidade podem incentivar o crescimento microbiano e até reduzir a eficiência dos filtros HEPA [1][3].
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Introdução ao ISO 14644-2 {Part 1} - Plano de Monitoramento de Salas Limpas (2019)
Procedimentos de Monitoramento de Partículas no Ar
O monitoramento preciso de partículas no ar começa com uma avaliação de risco sólida e é apoiado por procedimentos precisos que garantem a coleta de dados confiáveis e respostas oportunas.
Operação de Contadores de Partículas no Ar
Para capturar dados precisos de partículas, use Contadores de Partículas no Ar por Dispersão de Luz (LSAPC) que atendam aos padrões ISO 21501-4 . Esses dispositivos devem ser calibrados com partículas rastreáveis pelo NIST para medições confiáveis. Coloque sensores em pontos críticos de controle, garantindo que não obstruam o tráfego da sala limpa ou interrompam o fluxo de ar.Para leituras precisas, posicione a sonda a 30 cm da área de trabalho, alinhando-a com o fluxo de ar para manter condições de amostragem isocinética.
É importante notar que a contagem de partículas difere significativamente entre condições "em repouso" (equipamento funcionando, sem pessoal presente) e estados "em operação", onde a atividade aumenta os níveis de partículas. Mudar de classificação periódica para monitoramento contínuo é fundamental para detectar picos de curta duração que testes manuais podem não perceber [1].
Essa abordagem metódica naturalmente apoia o estabelecimento de limites claros para ação.
Estabelecendo Níveis de Alerta e Ação
Uma vez que os sensores estão instalados, definir níveis de alerta e níveis de ação é essencial para minimizar os riscos de contaminação.
Os limites devem ser baseados em uma estratégia baseada em risco, em vez de simplesmente adotar os limites de classificação ISO.Os níveis de alerta atuam como avisos antecipados, sinalizando desvios das condições normais. Os níveis de ação, por outro lado, são definidos na concentração máxima de partículas permitida para sua Classe ISO e exigem investigação imediata e ação corretiva. Por exemplo, ambientes de Classe ISO 5 limitam a contagem de partículas a no máximo 3.520 partículas (≥0,5 µm) por metro cúbico, tornando-os cerca de 100.000 vezes mais limpos do que o ar interno típico [1]. Ao definir níveis de alerta abaixo desses limites, você cria uma margem para investigar possíveis problemas, como degradação gradual do filtro HEPA ou falhas de vedação.
Cada decisão sobre os limites deve ser documentada em seu plano de monitoramento. Isso inclui o raciocínio por trás de cada nível e os procedimentos de resposta correspondentes.Além disso, combinar dados de partículas com outras métricas ambientais - como diferenciais de pressão, temperatura e umidade - ajuda a identificar fatores que contribuem para incidentes de contaminação.
Métodos de Monitoramento Microbiano
Além do monitoramento de partículas no ar, o teste microbiano desempenha um papel fundamental na detecção de contaminantes vivos que podem afetar a produção de carne cultivada.
Contadores de partículas no ar se concentram na identificação de partículas não vivas, mas o monitoramento microbiano é necessário para descobrir organismos vivos que poderiam comprometer ambientes de salas limpas. Enquanto a ISO 14644 fornece diretrizes para classificação de partículas, instalações de carne cultivada também devem gerenciar limites microbiológicos, particularmente em zonas críticas onde os produtos estão expostos.
Amostragem Ativa e Passiva de Ar
Amostragem ativa de ar envolve o uso de amostradores de ar microbianos para puxar um volume específico de ar para meios de cultura, fornecendo resultados em UFC/m³. Este método permite controle preciso sobre a localização e o volume da amostragem, tornando-o ideal para validar áreas críticas durante a qualificação de desempenho. Por outro lado, amostragem passiva usa placas de sedimentação deixadas expostas por 1–4 horas para monitorar tendências ambientais com equipamento mínimo.
Em áreas críticas ISO 5, que estão alinhadas com os padrões GMP Grau A, os limites microbianos são excepcionalmente rigorosos. A Orientação de Processamento Asséptico de 2004 da FDA dos EUA destaca isso, afirmando:
Amostras de ambientes Classe 100 (ISO 5) normalmente não devem apresentar contaminantes microbiológicos [6].
Qualquer presença microbiana em áreas ISO 5 exige investigação imediata e uma análise minuciosa da causa raiz.
Juntos, os métodos de amostragem ativa e passiva formam a base para um monitoramento de superfície eficaz.
Técnicas de Amostragem de Superfície
A amostragem de superfície é uma adição crucial ao monitoramento do ar, focando na detecção de contaminação em superfícies de trabalho, equipamentos e outras áreas críticas. Placas de contato (RODAC), geralmente com 55 mm de diâmetro, são pressionadas contra superfícies lisas por cerca de 10 segundos para transferir microrganismos diretamente para o meio de cultura, fornecendo resultados mensuráveis. Para superfícies irregulares ou de difícil acesso, amostragem com swab é mais eficaz. Swabs estéreis pré-umedecidos são usados em um movimento sistemático em "S" em áreas definidas (25–100 cm²) para garantir uma amostragem completa e representativa [5] .
Ambos os métodos requerem meios de cultura com agentes neutralizantes, como o caldo Letheen, para neutralizar quaisquer desinfetantes residuais que possam inibir o crescimento microbiano e causar falsos negativos. As condições de incubação são adaptadas ao tipo de organismo: bactérias são incubadas a 30–35°C, enquanto fungos requerem 20–25°C por até cinco dias [5]. A verificação pós-limpeza, realizada após a limpeza, mas antes do início da produção, garante que o ambiente atenda aos padrões exigidos. Como explica Vaibhavi M., um especialista na área:
O monitoramento de superfícies forma a base dos programas de controle de contaminação em salas limpas farmacêuticas [5].
Sistemas Automatizados de Monitoramento Ambiental
Sistemas automatizados fornecem um fluxo constante de dados em tempo real sobre fatores como contagem de partículas, pressão, temperatura e umidade.Este monitoramento contínuo captura eventos de contaminação fugazes que testes periódicos podem não detectar, oferecendo um complemento valioso aos métodos manuais.
A revisão de 2015 da ISO 14644-2 destaca os benefícios do monitoramento automatizado, particularmente na habilitação da requalificação baseada em dados. Ao capturar dados de forma confiável que atendem aos padrões regulatórios, esses sistemas podem ajudar a estender os intervalos entre os testes de classificação formal, reduzindo, em última análise, os custos [7].
Um exemplo de advertência vem de junho de 2024, quando a FDA emitiu um aviso para Optikem International Inc. A empresa havia confiado exclusivamente no monitoramento periódico, que falhou em detectar eventos de contaminação entre fevereiro de 2021 e março de 2023. Essa falha levou a instalação a ser considerada inadequada para a produção de medicamentos estéreis [1].
Configuração de Sistemas de Monitoramento Contínuo
Ao implementar um sistema de monitoramento automatizado, é essencial garantir que todos os contadores de partículas aéreas estejam em conformidade com os padrões ISO 21501-4 e suportem o FDA 21 CFR Parte 11 para registros eletrônicos, incluindo recursos como trilhas de auditoria e assinaturas eletrônicas [7]. Os melhores sistemas oferecem painéis em tempo real que monitoram simultaneamente parâmetros chave como contagem de partículas, diferenciais de pressão (tipicamente 10–15 Pascais), temperatura (18–22°C) e umidade (30–60%) [1].
A colocação adequada das sondas de monitoramento é crítica. As sondas devem ser posicionadas a até 305 mm (1 pé) de produtos expostos ou áreas de trabalho críticas [7]. Salas limpas maiores requerem pelo menos um sensor para cada 100 m² do ambiente de fundo, com sensores adicionais em zonas de transição como antecâmaras. Para áreas com fluxo de ar unidirecional, sondas de amostragem isocinéticas são recomendadas para garantir amostragem precisa [7].
Configurar alertas com base em tendências de dados históricos - em vez de apenas limites máximos ISO - pode melhorar a capacidade de resposta do sistema. Como EU GMP Anexo 1 aconselha:
A zona de Grau A deve ser monitorada com uma frequência e tamanho de amostra adequados para que todas as intervenções, eventos transitórios e qualquer deterioração do sistema sejam capturados e alarmes sejam acionados se os limites de alerta forem excedidos [7].
Alguns sistemas até incluem mapas SOP interativos para auxiliar na colocação de sondas. A integração com Sistemas de Gestão Predial (BMS) ou plataformas SCADA pode centralizar a supervisão e potencialmente reduzir o consumo de energia em até 10% [1].
Uma vez instalados, esses sistemas tornam-se uma parte integrada das operações diárias, permitindo ações imediatas em resposta às flutuações ambientais.
Analisando Dados de Monitoramento em Tempo Real
A análise de dados em tempo real funciona em conjunto com os protocolos de monitoramento de partículas e microrganismos. Ao permitir respostas imediatas a eventos de contaminação, pode evitar que problemas menores se agravem. Analisar tendências ao longo do tempo também pode revelar declínios graduais no desempenho do filtro HEPA ou na integridade das vedações, ajudando a resolver problemas potenciais antes que levem a falhas de classificação [1]. Ferramentas de software avançadas podem até correlacionar picos de partículas com atividades específicas, como aberturas de portas ou ciclos de HVAC, para identificar causas raízes [1].
Em zonas de Grau A/B (ISO 5), contagens consecutivas de partículas ≥5,0 µm devem levar a uma investigação.A orientação da EU GMP afirma:
A contagem consecutiva ou regular de baixos níveis [de partículas de 5,0 µm] é um indicador de um possível evento de contaminação e deve ser investigada [7].
Os níveis de alerta devem ser escalonados, com protocolos que variam de investigações menores a respostas críticas que exigem a interrupção da produção [1]. Os recursos de gerenciamento remoto permitem que supervisores revisem e aprovem dados via navegadores da web, simplificando a documentação de conformidade [7]. Para aqueles que buscam uma abordagem simplificada, soluções de Monitoramento como Serviço (MaaS) estão disponíveis, a partir de £600 por mês [1].
Para instalações de carne cultivada que buscam soluções personalizadas,
Conectando Monitoramento com Manutenção e Conformidade
Os dados de monitoramento ambiental não devem existir isoladamente. Os programas de sala limpa mais eficazes vinculam contagens de partículas, leituras de pressão e recuperações microbianas com métricas de desempenho de HVAC e cronogramas de limpeza. Ao fazer isso, os dados brutos se transformam em insights acionáveis, permitindo melhores decisões de manutenção e reforçando a conformidade durante auditorias.
Correlacionando Monitoramento com HVAC e Limpeza
Integrar dados de monitoramento com registros de manutenção fortalece os esforços de conformidade e simplifica o controle de qualidade contínuo.
Análise de tendências desempenha um papel crucial na manutenção preditiva. Em vez de reagir a falhas de classificação súbitas, o monitoramento contínuo pode identificar problemas graduais, como o desempenho decrescente do filtro HEPA ou a integridade enfraquecida de vedação, antes que eles se transformem em problemas maiores [1].Por exemplo, o aumento na contagem de partículas ou níveis de pressão caindo abaixo de 10–15 Pascals pode indicar ineficiências no sistema HVAC [1].
Alinhar dados ambientais com eventos operacionais pode ajudar a identificar anomalias. Em instalações de carne cultivada, esse alinhamento é essencial para manter condições assépticas. Por exemplo, monitorar picos de partículas junto com aberturas de portas, movimentos de pessoal ou ciclos de equipamentos pode ajudar as equipes de manutenção a identificar problemas mecânicos ou procedimentais específicos, em vez de recorrer a revisões gerais do sistema [1]. Além disso, níveis aumentados de umidade podem comprometer o desempenho dos filtros HEPA e incentivar o crescimento microbiano, sinalizando a necessidade de ajustes no HVAC [1].
Recuperações microbianas atuam como uma medida direta da eficácia da limpeza.Se a amostragem de ar ou superfície revelar contagens microbianas elevadas, pode ser necessário aumentar a frequência de limpeza ou revisar os protocolos de saneamento [8].
As salas limpas de Classe ISO 5, que exigem 240–600 trocas de ar por hora para manter os limites de partículas, se beneficiam de sistemas de monitoramento integrados com Sistemas de Gestão Predial (BMS) ou plataformas SCADA. Essas integrações centralizam a supervisão e ajudam a garantir que os parâmetros críticos permaneçam estáveis [1].
Registro e Revisão de Dados de Monitoramento
Documentação completa é essencial para auditorias de conformidade ISO. Isso inclui manter um plano de monitoramento, registros de calibração e trilhas de auditoria com registro de data e hora, conforme exigido pelos padrões ISO e FDA [1][3][7].
Sistemas que estão em conformidade com a FDA 21 CFR Parte 11 garantem que os registros atendam aos princípios ALCOA - Atribuível, Legível, Contemporâneo, Original e Preciso [7]. Plataformas automatizadas podem criar bancos de dados seguros e criptografados onde registros históricos não podem ser excluídos, preservando a integridade exigida pelos reguladores. Recursos como aprovação remota permitem que supervisores revisem e aprovem dados de monitoramento diário através de navegadores web, agilizando os processos de conformidade [7] .
Ao revisar dados, é importante focar em tendências em vez de incidentes isolados. Padrões graduais de deterioração frequentemente revelam problemas antes que atinjam níveis críticos [1][2]. Como aponta Particle Measuring Systems:
Sem medição não há controle [2] .
Organizar dados por pontos críticos de controle - como zonas de enchimento ou equipamentos específicos - em vez de dados gerais de sala torna as investigações mais direcionadas e eficientes [7].
Dados de monitoramento consistentes que demonstram condições estáveis também podem apoiar a extensão dos intervalos de teste de classificação, reduzindo os custos operacionais sem comprometer a conformidade [1][2]. Com mais de 30% das citações da FDA ligadas a deficiências nos Sistemas de Qualidade [1], registros de monitoramento robustos fornecem uma salvaguarda crítica durante as inspeções.
Para instalações de carne cultivada,
Conclusão
A implementação do monitoramento ISO 14644 na produção de carne cultivada requer uma avaliação de risco bem estruturada. Este processo deve identificar pontos críticos de controle, determinar a colocação ideal dos sensores e estabelecer níveis práticos de alerta e ação para garantir um controle eficaz de contaminação [9].
A mudança de testes periódicos para monitoramento automatizado contínuo marca uma grande mudança na gestão de salas limpas. Enquanto a ISO 14644-1 fornece a estrutura para a classificação inicial, os sistemas de monitoramento contínuo podem detectar flutuações de curto prazo que os testes periódicos podem completamente ignorar [1][2]. Ao oferecer dados em tempo real sobre contagem de partículas, diferenciais de pressão, temperatura e umidade, esses sistemas permitem que os operadores mantenham condições assépticas e abordem riscos potenciais de contaminação antes que eles se agravem.
Os fatores humanos também influenciam significativamente o controle de contaminação. Como a atividade humana é a principal fonte de contaminação microbiana em salas limpas [9], alinhar os dados de monitoramento com os movimentos do pessoal, protocolos de vestimenta e condições operacionais é crucial. Sistemas automatizados integrados com Sistemas de Gestão Predial oferecem trilhas de auditoria com carimbo de data/hora e à prova de adulteração - chave para atender às expectativas regulatórias, especialmente considerando que mais de 30% das citações da FDA envolvem Sistemas de Qualidade [1].
O monitoramento contínuo também mitiga riscos regulatórios, conforme destacado pelo aviso da FDA à Optikem International Inc. em junho de 2024. Este caso ressaltou os perigos de confiar apenas em verificações periódicas, que permitiram que eventos críticos de contaminação passassem despercebidos.O resultado foi uma determinação de que a instalação era inadequada para produção estéril, exigindo uma avaliação completa dos riscos de contaminação [1].
Perguntas Frequentes
Como decido o que monitorar primeiro na minha sala limpa?
Para garantir a conformidade com a ISO 14644 e manter um ambiente controlado estável para a produção de carne cultivada, é essencial focar em alguns parâmetros-chave. Estes incluem contagem de partículas, diferenciais de pressão do ar, temperatura e umidade - todos os quais desempenham um papel direto na manutenção da limpeza do ar e estabilidade ambiental.
Também é importante priorizar os esforços de monitoramento com base nas áreas mais em risco de contaminação. Fatores como movimentação de pessoal e manuseio de materiais podem impactar significativamente a limpeza. Coloque estrategicamente pontos de amostragem em zonas críticas para coletar dados representativos e garantir um monitoramento eficaz.
Com que frequência devo amostrar partículas e micróbios em áreas de Classe ISO 5?
A amostragem de partículas em áreas de Classe ISO 5 precisa ocorrer pelo menos a cada seis meses para garantir que os padrões sejam mantidos. Para testes microbiológicos, a frequência é determinada por avaliações de risco e os planos de monitoramento já existentes. Esses planos são projetados para alinhar-se com os padrões ISO 14644, e é crucial revisá-los regularmente. Isso ajuda a manter a integridade da sala limpa e garante que todos os requisitos regulatórios sejam atendidos.
O que devo fazer quando um limite de alerta ou ação é ultrapassado?
Se um limite de alerta for excedido, é importante intensificar o monitoramento, investigar possíveis causas e registrar suas descobertas.Por outro lado, violar um limite de ação requer intervenção imediata - isso pode incluir a interrupção das operações, se necessário, identificar a causa raiz e tomar medidas corretivas. Seguir esses procedimentos ajuda a garantir a conformidade com os padrões ISO 14644 e preserva as condições da sala limpa, que são cruciais para ambientes como os usados na produção de carne cultivada.
